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第一部分 低强度微波辐射阻断晶状体上皮细胞周期及对相关调控基因表达的影响 【目的】 检测不同剂量微波辐射对兔晶状体上皮细胞（rabbit lens epithelial cells，RLECs）增殖活性及细胞周期的影响，并测定微波辐射后细胞周期调控基因P21?、P27?和c-myc表达量的改变。初步探讨体外培养的兔晶状体上皮细胞对微波辐射损伤的耐受剂量，以及辐射损伤的分子机制。 【方法】 应用频率2450MHz，功率密度分别为0.10mW／cm2、0.25mW／cm2、0.50mW／cm2、1.00mW／cm2、2.00mW／cm2的微波连续辐照体外培养的RLECs 8h，分别用相差显微镜和HE染色观察辐射后细胞形态学的改变；四唑盐（MTT）比色法测定细胞增殖活性；PI荧光染色后用流式细胞仪检测微波辐射对细胞周期各个时相的影响；Western印迹 晰江大李雄科李博士毋位论义—研宪摘要.洲冲年万月名法检测2.OOmw/cm:微波辐照4h、6h和8h后PZI，‘，’、P27‘’‘.‘和c一myc基因表达量的改变，RT一l，CR法检测PZ一协”‘、I〕27队’;”mRNA的表达。【结果】 高于0.5（） mw/Cm二的微波连续辐射8h，可降低细胞增殖活性:用相差显微镜观察发现，微波辐射可引起I{l.L汇、肿胀和聚集，甚至出现细胞固缩和脱壁现象:同时高于0.5（）mw/cm犷的微波辐射可抑制细胞D、A合成，偷/G.期细胞百分比分别为71.95%士2.12%、75.6跳士3.肠%、82.4（）%士8.68%，高于对照组61.68%土5.76%，差异有显著性（/划）.（）5或只0.01):功率密度为o.l（）、0.25 mw/cm:的微波辐射组对细胞增殖活性和细胞周期无影响，与对照组比差异无显著性（乃0.0，5）;2.OOmw/c而微波辐照后!’2产l.l表达水平明显升高，辐照4h、6h、8h后的表达量分别是对照组的!.69士0.15、2.14士0.5】和2.;犯士0.30倍，差异有显著性（只0.01），而C一myc表达水平在辐射后下降，辐射4h、6h、8h后的表达量分别是对照组的0.50士0.!9、0.35士（）.日和0.1生士0.（）4倍，差异有显著性（只0.（）l），l)21协、11的表达量在辐射前后无变化（/侧）.（）5);咫!协‘，l、1)27}、””m尺抓的表达在辐射前后均无明显改变，与对照组比较差异无显著性意义（乃0.（）5）。【结论】l、功率密度高于0.50 mw/cm一的微波辐射可引起毗ECs产生形态学改变，并阻断细 胞增殖周期，使细胞停滞于G./(j.期，这种损伤对晶状体的生长发育及维持其正常 生理功能具有潜在的危害性。2、低强度微波辐射阻断晶状体上皮细胞增殖周期可能通过分别调节P27卜””和C一myc 这两个调控细胞周期转换的基因而实现的，对细胞周期另一重要的调控基因 !’别’、、，’的表达不影响。3、微波辐射对细胞周期G./s限制点重要调控因子P27卜””的调节可能为转录后调节， 主要通过调节尸27卜i”’转录后的蛋白水平起作用，而对其mRNA的表达不影响。