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半乳寡糖是半乳凝素3(Gal-3)的良好抑制剂,而Gal-3与癌症发生发展密切相关。因此半乳寡糖在抗肿瘤药物研发的方面具有潜力。本文以酸碱修饰橘皮果胶中性糖级分中的半乳聚糖M-Galactan和土豆半乳聚糖P-Galactan为原料,通过酶解法和部分酸水解法这两种方法进行降解,分离纯化后得到不同的半乳寡糖,利用薄层层析、凝胶层析、高效液相色谱等鉴定产物的纯度和聚合度。结果如下:酶解法制备半乳寡糖。在35 oC的条件下,用0.3 U/ml的半乳糖内切酶(Endo-β-1,4-Galactanase)对M-Galactan酶解6 h,产物用凝胶层析Bio-Gel P2进行分离纯化,得到M-Oligo-2,3,4三个级分。经过HPLC检测,确定M-Oligo-2,3,4依次为半乳二糖、半乳三糖和半乳四糖。同样方法,酶解P-Galactan9 h,得到P-Oligo 2,3,4三个级分,经分析确定P-Oligo-2,3,4依次为半乳二糖、半乳三糖和半乳四糖。酶解两种半乳聚糖制备半乳寡糖,以M-Galactan原料制备半乳寡糖所需酶解时间短,而且主要活性产物半乳四糖的产率为36%高于P-Galactan的16%。部分酸水解:在80 oC的条件下,用0.2 M的三氟乙酸(TFA)对M-Galactan和PGalactan各水解4 h。(I)将M-Galactan部分酸水解产物用Bio-Gel P2进行分离纯化,共得到M-G-2,3,4,5四个级分。经过HPLC检测后,最终确定M-G-2,3,4,5依次为半乳二糖、半乳三糖、半乳四糖和半乳五糖;(II)先利用Q-Sepharose Fast Flow除去PGalactan部分酸水解产物中的酸性糖,得到中性糖级分GA-H2O。再利用Sephadex G-50对GA-H2O进行分离纯化,共得到GA-H2O-1,2,3,4,5五个级分。经过HPLC检测后,最终确定GA-H2O-1,2,3,4,5是平均聚合度依次为2,4,5,7,12的半乳寡糖。部分酸水解两种半乳聚糖制备半乳寡糖,以M-Galactan为原料得到的产物分子量分布集中,产物分离纯化过程比较简单。所以M-Galactan是制备半乳寡糖的原料比较理想的原料。