激素和激素样物质是控制细胞分化和增殖的重要因素。有资料表明，雌激素受体(estrogen receptor，ER)不仅存在于乳腺、子宫等各器官靶细胞中，在许多非靶器官组织如肝、肾、结肠、胰、口腔粘膜甚至皮肤也能测出雌激素受体，雌激素受体在肿瘤组织中的存在也逐渐引起人们的重视。目前大量的雌激素仍在用于各种临床治疗，雌激素与肿瘤的关系日益成为人们的研究热点。美国食品药物管理局(FDA)在2002年公布的7种致癌物中，雌二醇(E2)名列榜首。已有大量文献报道E2对胃癌，子宫内膜癌，乳腺癌，胰腺癌等有促增殖作用，但目前对E2是否能促进腺样囊性癌细胞增殖和转移的研究尚未见报道。 腺样囊性癌是涎腺最常见的恶性肿瘤之一，约占涎腺恶性肿瘤的27％，是颌下腺及小涎腺最常见的肿瘤之一，虽生长相对缓慢，但以其侵袭性强，手术后易于复发及转移为其临床特点。 本研究根据E2临床用药在体内的药物浓度，利用由北京医科大学颌面外科建立的腺样囊性癌(SAcc83)来进行实验，探讨E2对腺样囊性癌细胞增殖和转移的影响，为临床用药、预防和治疗提供一定的理论依据。 本实验体外实验采用MTT法、细胞计数、细胞分裂指数、软琼脂克隆形成实验、流式细胞仪、免疫细胞化学等方法研究E2第四军医大学硕士学位论文对腺样囊性癌细胞增殖的影响;通过鸡胚心侵袭实验、SDS聚丙烯酞胺凝胶电泳研究17一p雌二醇对人涎腺腺样囊性癌细胞的转移影响情况。体内实验通过对切除卵巢后(去势)的雌裸小鼠尾静脉注射方法建立动物转移模型和皮下致瘤实验，研究雌二醇在体内对动物的增殖和转移能力的影响。 实验结果如下: 1.MTT法检测10一5、10一6、10一7、10一8、一。一gmol/L的EZ对SAcc83均有促增殖作用，其中10一7mol/L作用最显著(尸<0.01) 2.细胞计数法描绘细胞生长曲线，运用细胞生长曲线的测定公式计算所得对照、10一7、10一“、10一”mol/L各组的细胞群体倍增时间分别为52.8、43.7、50.9、47.lh，EZ作用组细胞群体倍增时间缩短率(%)分别为17.2，3.6，10.8。 3.用细胞分裂指数法测定并描绘细胞分裂指数曲线，可以看出对腺样囊性癌细胞施加lxlo一7mol几的EZ对细胞分裂指数影响显著。作用1，2，3d时细胞分裂指数分别增加了33.3%，40.9%，1 7.8%。 4.软琼脂克隆形成实验测得在lxlo一7mol/L的EZ作用下克隆形成率增加了39.0%(P<0.01)。 5.流式细胞仪进行细胞周期分析的结果显示，在lx10一7mol/L的EZ作用下12，18，24h时s期腺样囊性癌细胞分别增加了12.3%，3.3%和9.7%。 6.免疫组织化学结果显示在lx10一7mol/L的EZ作用下腺样囊性癌细胞PCNA表达也相应增强。 7.鸡胚心侵袭实验结果表明lx10一7mol/L的EZ作用下腺样囊性癌细胞和对照组腺样囊性癌细胞侵袭面积与复合体面积之比分别为0.640士0.079和0.291士0.051，二者之间差异显著(P<0 .01)，试验组侵袭面积增加了120%。第四军医大学孑项卜学位论文 8.sDS聚丙烯酞胺凝胶电泳显示1 xlo一7mol/L的EZ作用下92kDa处的基质金属蛋白酶电泳条带亮度较对照组明显增大，说明MMP一9酶原活性较高。 9.裸鼠皮下致瘤性实验，对照组细胞皮下致瘤性8/8，瘤体倍增时间76.5h:1 x 10一7mol几的EZ组细胞皮下致瘤性8/8，瘤体倍增时间61.5h。接种15天后处死裸鼠，称取瘤重对照组和EZ组分别为420.4士147.8 mg和524.6士120.7mg，试验组肿瘤比对照组增加了24.8%。裸鼠皮下肿瘤组织切片表现为典型的腺样囊性癌的组织学特征:不典型的筛网和小条索状结构，肿瘤细胞成片状，含大小不等的囊腔，间质结缔组织多少不一。 10.裸鼠肺转移实验经裸鼠尾静脉注射l.oxl护/0 .2ml个细胞42天后对照组与EZ组(每日腹部皮下注射浓度为9.55x10一，mol/L的EZ溶液0.2ml)，EZ组所引起的肺转移结节数分别为10.2士6.3(3、20、8、12、8)和14.4士13.7(16、13、5、36、2)，肺转移结节形成率增加了41.2%。 实验结果表明:10一7mol/L的EZ对SAcc83细胞有明显的促增殖作用，同时在体内实验中对SAcc83细胞也有明显的促增殖和转移作用，提示这类雌激素应在严密监控下使用。