巨噬细胞移动抑制因子和血管内皮细胞生长因子在类风湿关节炎患者血清中的表达和意义

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目的:类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)是一种原因不明的自身免疫性疾病,以慢性、对称性、进行性多关节炎为主要临床表现。其分布于所有的种族和民族,患者遍及全球,国外统计RA患病率为0.5%~1%。据不完全统计,我国RA的患病率为0.3%~0.5%,男女之比约为1∶3,按此计算,我国大约有450万~600万患者,相当于一个中等城市的总人口,特别值得关注的是,约80%的患者发病年龄在20~45岁,以青壮年居多,造成了各种家庭问题以及巨大的社会负担,这对劳动力的损失,关节严重功能障碍,甚至残疾的情况是不容忽视的。多方面研究显示RA是一种与环境、细胞、病毒、遗传、性激素及神经精神状态等因素密切相关的疾病。其病理特征是滑膜细胞增生、多种炎性细胞浸润、血管翳形成以及骨和软骨下骨组织的破坏。血管翳形成被认为是RA病理过程的主要环节,而血管新生是产生和维持RA血管翳的主要标志,众多的细胞因子参与了血管新生的调节,近年来,巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)因涉及败血症、肿瘤和自身免疫性疾病的发病机制而成为研究的热点。血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)因直接作用于血管内皮细胞的有丝分裂原,是迄今为止已知的最强的促血管生长因子,在新生血管的形成过程中具有重要的作用。众多研究表明MIF和VEGF作为促血管生成因子在多种肿瘤细胞中高度表达,且与肿瘤的发生、发展及远处转移关系密切。MIF可能通过诱导VEGF的表达而促进肿瘤新生血管的形成和侵袭转移,那么MIF和VEGF在RA发生发展过程中是否也呈协同一致表达,本研究通过酶联免疫吸附实验(ELISA)检测RA患者血清MIF和VEGF的表达水平,分析二者与RA患者临床指标之间的关系,并探讨两者在RA发病机制中的作用。方法:(1)收集56例来我院就诊的门诊及住院的RA患者,均符合1987年美国风湿病学会(ACR)修订的RA分类诊断标准,根据RA病情活动标准和缓解标准分为RA活动组和RA缓解组;另收集16例骨性关节炎(osteoarthritis,OA)患者作为阴性对照组及15例健康体检者作为正常对照组,各组间年龄、性别构成均无统计学差异。(2)记录入组者相关资料:姓名、性别、年龄、病程、晨僵时间、血沉(ESR)、血小板(PLT)、C-反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF),同时评价患者的关节压痛指数、关节肿胀指数、关节活动痛指数、关节休息痛指数。(3)所有入组者均空腹采肘静脉血3ml,离心后取上清液,置-70℃低温冰箱保存,待实验前在室温下一次解冻。(4)采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测入组者血清MIF和VEGF的水平,具体操作步骤和方法严格按试剂盒说明书要求进行,在酶标仪上读取吸光度(A)值,以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标,绘制标准曲线,计算出各组血清中MIF和VEGF的浓度。(5)应用SPSS13.0统计软件进行统计学分析。结果:(1) RA患者血清MIF、VEGF水平明显高于OA组(P<0.05)及正常对照组(P<0.01)。(2) RA活动组患者血清MIF、VEGF水平明显高于RA缓解组(P<0.01)。(3)与活动指标的相关性分析:RA活动组患者血清MIF、VEGF表达水平与晨僵时间、ESR、PLT、CRP、关节压痛指数、关节肿胀指数、关节活动痛指数、关节休息痛指数呈正相关(P<0.01),而与年龄、病程、RF无相关性(P>0.05)。(4) RA活动组患者血清MIF与VEGF的表达水平成正相关关系(P<0.01),而在RA缓解组,OA组及正常对照组中血清MIF与VEGF的表达水平无相关性(P>0.05)。结论:(1) MIF和VEGF在RA患者血清中高水平存在,提示二者参与了RA的发病。(2)联合检测血清MIF和VEGF水平,有助于RA疾病活动性的判断。(3)在RA活动期,血清MIF和VEGF呈协同一致表达,提示MIF可能参与了VEGF的生成。
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