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1990年,Gold等三个小组分别报道了适配体(aptamer),他们指出适配体是人工合成的单链DNA或者RNA序列,具有高特异性、高亲和力、易于修饰和功能化等优点。作为传统抗体的替代物,在临床诊断、靶向治疗、药物残留检测等许多领域已经引起了高度重视。毛细管电泳(capillary electrophoresis, CE)是一种高效、快速、低成本的微量分离分析技术,已经广泛应用于环境检测、生化分析、药物分析和食品分析等领域。化学发光(chemiluminescence, CL)检测具有检测灵敏度高、线性范围宽和仪器设备简单等优点,迅速发展成为CE最灵敏的检测手段之一。CE与CL的联用同时满足了分离效率和灵敏度的要求,成为分析复杂生物样品的有效手段。本论文开拓了基于适配体-纳米金的毛细管电泳化学发光超灵敏检测蛋白质的新途径、新方法和新技术,主要创新工作如下:1.首次将适配体作为识别蛋白质的元素应用到毛细管电泳化学发光检测中。纳米金(AuNPs)作为传感平台,与SH-aptamer结合形成AuNPs-aptamero选择凝血酶(thrombin)和凝血酶适配体作为识别对。AuNPs-aptamer连接上thrombin形成AuNPs-aptamer-thrombin复合物。生成的复合物和过量的未结合的AuNPs-aptamer通过毛细管电泳分离,luminol-H2O2化学发光检测。此方法超灵敏检测了fmol/L水平的凝血酶,线性范围为0.033-66.0pmol/L,检出限低达13.5fmol/L (S/N=3)。此方法已经成功地应用于检测外伤病人和非外伤病人血浆中的凝血酶的含量。凝血酶在人血浆中的加标回收率在87.6-116.8%之间。该方法具有许多显著的优点,包括aptamer的高特异性,AuNPs的高催化活性,化学发光检测的高灵敏度和毛细管电泳的高分离效率。2.首次将适配体应用于毛细管电泳化学发光中超灵敏检测人免疫球蛋白E。AuNPs对luminol-H2O2体系的高催化能力,可以显著提高检测的灵敏度。SH-aptamer和AuNPs结合形成AuNPs-aptamer。加入人免疫球蛋白E(human immunoglobulin E,hIgE)后,AuNPs-aptamer特异性的结合hIgE形成AuNPs-aptamer-IgE复合物。然后通过毛细管电泳分离,化学发光检测。在优化条件下,超灵敏检测了7.6fmol/L(S/N=3)的IgE,线性范围为0.025-250pmol/L。利用此方法检测了人血清样品中的IgE,加标回收率在94.9-103.2%之间。此方法具有优秀的行为特性,如高特异性,高灵敏性,好的适应性和少的样品消耗。