适配体—纳米金毛细管电泳化学发光超灵敏检测

来源 :信阳师范学院 | 被引量 : 1次 | 上传用户:bohedan
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
1990年,Gold等三个小组分别报道了适配体(aptamer),他们指出适配体是人工合成的单链DNA或者RNA序列,具有高特异性、高亲和力、易于修饰和功能化等优点。作为传统抗体的替代物,在临床诊断、靶向治疗、药物残留检测等许多领域已经引起了高度重视。毛细管电泳(capillary electrophoresis, CE)是一种高效、快速、低成本的微量分离分析技术,已经广泛应用于环境检测、生化分析、药物分析和食品分析等领域。化学发光(chemiluminescence, CL)检测具有检测灵敏度高、线性范围宽和仪器设备简单等优点,迅速发展成为CE最灵敏的检测手段之一。CE与CL的联用同时满足了分离效率和灵敏度的要求,成为分析复杂生物样品的有效手段。本论文开拓了基于适配体-纳米金的毛细管电泳化学发光超灵敏检测蛋白质的新途径、新方法和新技术,主要创新工作如下:1.首次将适配体作为识别蛋白质的元素应用到毛细管电泳化学发光检测中。纳米金(AuNPs)作为传感平台,与SH-aptamer结合形成AuNPs-aptamero选择凝血酶(thrombin)和凝血酶适配体作为识别对。AuNPs-aptamer连接上thrombin形成AuNPs-aptamer-thrombin复合物。生成的复合物和过量的未结合的AuNPs-aptamer通过毛细管电泳分离,luminol-H2O2化学发光检测。此方法超灵敏检测了fmol/L水平的凝血酶,线性范围为0.033-66.0pmol/L,检出限低达13.5fmol/L (S/N=3)。此方法已经成功地应用于检测外伤病人和非外伤病人血浆中的凝血酶的含量。凝血酶在人血浆中的加标回收率在87.6-116.8%之间。该方法具有许多显著的优点,包括aptamer的高特异性,AuNPs的高催化活性,化学发光检测的高灵敏度和毛细管电泳的高分离效率。2.首次将适配体应用于毛细管电泳化学发光中超灵敏检测人免疫球蛋白E。AuNPs对luminol-H2O2体系的高催化能力,可以显著提高检测的灵敏度。SH-aptamer和AuNPs结合形成AuNPs-aptamer。加入人免疫球蛋白E(human immunoglobulin E,hIgE)后,AuNPs-aptamer特异性的结合hIgE形成AuNPs-aptamer-IgE复合物。然后通过毛细管电泳分离,化学发光检测。在优化条件下,超灵敏检测了7.6fmol/L(S/N=3)的IgE,线性范围为0.025-250pmol/L。利用此方法检测了人血清样品中的IgE,加标回收率在94.9-103.2%之间。此方法具有优秀的行为特性,如高特异性,高灵敏性,好的适应性和少的样品消耗。
其他文献
目的合成可用作药物制剂辅料的氧化葡聚糖。方法以葡聚糖40为反应起始物、高碘酸钾为氧化剂,在适宜条件下制备氧化葡聚糖,以红外分光光度计、紫外分光光度计、旋光仪测定其结
金属与氟代β-二酮配体所形成的配合物以其多样的结构和广泛的用途愈来愈受到人们的重视。该类配合物在金属有机化学气相沉积、生物活性及功能材料等领域都有广泛的应用前景
共享单车运营过程中出现的周转率低、调度成本过高等问题制约了城市慢行交通的发展。针对现有自行车调度模型假设条件的局限性,提出共享经济模式下转运最大化策略。在详细分
“2012哲学、工程与技术国际论坛(fPET-2012)”于2012年11月2-4日在北京友谊宾馆召开。本次论坛由中国科学院大学主办,美国工程教育学会工程与社会分部、国际工程研究网络、
高考招生分数在一定程度上代表了学校的生源质量,对它的研究可以得出高校生源质量的规律性认识。对江西省域内的24所普通本科高校在2008~2011年各省市区招生分数的研究表明,
目的探讨静脉输液查对习惯养成的影响因素及相关对策,提高低年资护士静脉输液查对落实率,保证护理安全。方法选择某三级甲等医院工作5年及5年以下的护士288名,按照《医院"低
具有丰富细节的新闻报道,能为新闻报道增色,吸引读者的注意力,增强读者的阅读欲望。因此,无论是事件还是人物报道,都离不开细节的描写。党报在宣传报道时,更应该注重细节,以
随着互联网的快速发展,店面租金的不断上涨,传统实体零售业遭到巨大冲击。本文就我国传统零售业存在的问题,从新零售视角出发,针对性地提出了解决问题的相关对策,以促进传统
构建服务型政府,是政府自身发展的内在需要,也是实现经济与社会协调发展的新要求,尤其是建设人民满意的服务型政府,是近年来我国提出的行政体制改革的重要目标,本文首先对服
在电力现货市场下,为实现售电商长期收益最大化,提出采用强化学习的需求响应动态优化方案。首先建立售电商和用户的需求响应模型,通过建立用户舒适成本函数的前后联系,构建出