目的:通过高效液相色谱建立祛风止痛胶囊指纹图谱并测定主要成分含有量;基于网络药理学研究祛风止痛胶囊对神经病理性疼痛的潜在作用靶点和通路富集分析;通过行为学研究祛风止痛胶囊对小鼠坐骨神经慢性压迫性损伤所诱导的神经病理性疼痛的镇痛作用;使用药理学方法探讨其与TLR4/NF-κB信号通路的关系,为祛风止痛胶囊的临床应用提供科学依据。方法:1.祛风止痛胶囊甲醇提取液采用Agilent C₁₈色谱柱（4.6mm×250mm,5μm）,流动相甲醇（A）-0.2%磷酸水溶液（B）,梯度洗脱,体积流量1m L/min,柱温35℃,检测波长254nm,进样量10μL。2.祛风止痛胶囊的活性成分及其靶标基因通过TCMSP和BATMAN-TCM数据库获取,神经病理性疼痛相关靶标基因通过Gene Cards、Drug Bank、OMIM、TTD和CTD数据库获取。利用Cytoscape创建祛风止痛胶囊中化合物-靶基因和神经病理性疼痛相关基因靶网络,利用STRING数据库分析关键靶标,利用DAVID数据库分析途径富集。3.将小鼠随机分为假手术组（Sham）、模型组（CCI）、低剂量祛风止痛胶囊模型组（5mg/kg）、中剂量祛风止痛胶囊模型组（10mg/kg）、高剂量祛风止痛胶囊模型组（20mg/kg）;除Sham组外,其余各组通过坐骨神经慢性压迫性损伤（CCI）手术建立小鼠的神经病理性疼痛模型,术后连续灌胃给药14天;分别于造模前、造模后第1、3、5、7、10和14天进行行为学测试,von Frey仪测定实验小鼠对机械刺激的敏感性,热刺激仪测定实验小鼠对热刺激的敏感性,以评估祛风止痛胶囊治疗神经病理性疼痛的效果;通过免疫荧光法观察小胶质细胞的激活,小胶质细胞中TLR4和NF-κB p-p65的表达;Western Blot检测Iba-1、TLR4、NF-κB p65、NF-κB p-p65和c-Fos的蛋白表达水平;ELISA试剂盒检测TNF-α、IL-6、IL-1β炎性因子的释放。结果:1.通过HPLC建立祛风止痛胶囊指纹图谱,10批样品的相似度均大于0.986,表明祛风止痛胶囊的内在质量相对稳定。共鉴定并准确定量了7种主要化合物。分别为没食子酸、马钱苷酸、紫丁香苷、柯里拉京、马钱苷、鞣花酸和蛇床子素的含有量。2.网络分析确定了祛风止痛胶囊7种组方中的72个靶标基因与神经病理性疼痛高度关联,蛋白互作网络中的核心基因是INS、ALB、IL6、TNF、VEGFA、PTGS2、IL1β、AKT1、TLR4、FOS、CAT、MYC、BDNF、SRC、NGF。确定了与神经病理性疼痛相关的催乳素、HIF-1、VEGF、TNF、Toll样受体、T细胞受体、P13K-Akt、Rap1、How-STAT、NF-κB等核心信号通路。3.祛风止痛胶囊治疗明显缓解了CCI小鼠的机械性异常性疼痛和热痛觉过敏;小胶质细胞参与CCI诱导的疼痛超敏反应,CCI诱导小胶质细胞中TLR4和NF-κB p-p65的蛋白表达增加;而祛风止痛胶囊剂量依赖性地诱导脊髓中的Iba-1,TLR4和NF-κB p-p65下调;祛风止痛胶囊抑制疼痛标志物c-Fos表达并降低炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β表达。结论:首次建立祛风止痛胶囊指纹图谱并测定7种主要成分含有量,为下一步药效物质筛选提供参考和基础;通过网络药理学探讨祛风止痛胶囊治疗神经病理性疼痛的潜在药理作用靶点,为机制验证提供理论依据;明确祛风止痛胶囊可通过抑制小胶质细胞内TLR4/NF-κB信号通路减轻小鼠神经病理性疼痛,祛风止痛胶囊可被视为缓解神经病理性疼痛的潜在药物疗法。