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氯霉素是第一个人工合成的广谱抗生素,因其效高价廉,在我国畜牧业中得到广泛应用,对畜禽疾病的控制和治疗起到了重要的作用。随着氯霉素的广泛应用及研究的深入,发现其有许多毒、副作用,因此,必须控制氯霉素在动物性食品中的残留,保障消费者健康与安全。为了了解鸡蛋中氯霉素残留情况和建立一种准确、可靠的检测鸡蛋中氯霉素残留的方法以监控鸡蛋中氯霉素残留,本文研究了鸡蛋中氯霉素残留的高效液相色谱检测方法及消除规律。 将蛋白、蛋黄制成匀浆,用乙腈、乙酸乙酯、正己烷萃取及净化后,用流动相或35%的乙腈溶液重新溶解定容。紫外检测波长为280nm,流动相为乙腈:水(20:80,v/v),流速为1ml/min,进样量为50μl,最低检测限为0.002μg/g,用Waters Nova-PakC18(3.9×150mm)色谱柱分离检测。在上述条件下,氯霉素在鸡蛋(蛋白和蛋黄)中的最低检测限为0.002μg/g,标准曲线的线性范围为0.0021μg/g~20μg/g。氯霉素浓度为0.002μg/g、0.5μg/g、20μg/g时蛋白的批间变异系数分别为5.29%、3.43%、2.61%;批内变异系数分别为6.03%、3.52%、3.44%(第1批),6.32%、3.47%、1.14%(第2批),3.90%、3.73%、1.10%(第3批),5.58%、2.46%、3.03%(第4批);蛋黄的批间变异系数分别为5.58%、3.37%、1.59%;批内变异系数分别为6.53%、3.83%、1.34%(第1批),5.07%、2.78%、1.15%(第2批),5.31%、2.44%、1.10%(第3批),6.14%、3.28%、1.25%(第4批)。将氯霉素以0.0021μg/g、0.5μg/g和20μg/g分别添加到空白蛋白和蛋黄中,测得蛋白中氯霉素的回收率±标准误分别为105.65%+2.41%、94.89%±0.95%、91.65%±1.13%,蛋黄中氯霉素的回收率±标准误分别为104.79%±2.70%、83.15%±1.11%、80.27%±0.41%。结果表明,本文所建立的高效液相色谱方法是一种灵敏、可靠的检测鸡蛋(蛋白和蛋黄)中氯霉素残留的分析方法。 选用20只处于产蛋高峰期的健康海兰蛋鸡,单笼饲养,多剂量内服氯霉素(100mg/kg b.w,连喂12d),于停药后1d、2d、3d、4d…逐只逐日收集鸡蛋,用本研究所建立的方法分别检测蛋白、蛋黄中的氯霉素,直至检测不到氯霉素为止。采用MCPKP药物动力学参数计算程序处理蛋白和蛋黄中药物浓度——时间数据。停药当天,蛋白中的药物含量为3.61μg/g,蛋黄中的药物含量为14.51μg/g;停药5d,蛋白中的药物含量为0.05μg/g,蛋黄中的药物含量为7.17μg/g;停药8d,蛋白中已检测不到氯霉素,蛋黄中的药物含量为0.80μg/g;停药11d,蛋黄中尚有0.041μg/g的氯霉素,而停药12d,蛋黄中就检测不到氯霉素的含量。 蛋鸡多剂量内服氯霉素,连续给药12d,停药后,其在蛋白和蛋黄中的药动学主要参数分别为:氯霉素在蛋白中的AUC为9.96 mg/L·d,消除半衰期为0.75d;氯霉素在蛋黄中的AUC为81.46mg/L·d,在蛋黄中的消除半衰期为1.64d。 试验结果表明,蛋鸡多剂量内服氯霉素后,氯霉素在鸡蛋中的药动学特征是:易于吸收,多分布于蛋黄;氯霉素在蛋黄中的残留水平高,且在蛋黄中的消除较蛋白缓慢。