Sir2(silence information regulator)基因家族是一类从古细菌到哺乳类动物都保守的，具有NAD+依赖性的组蛋白或非组蛋白去乙酰化酶。酵母、线虫等Sir2蛋白与其底物相互作用在基因组稳定性、基因沉默、代谢调节及细胞寿命上起着至关重要的作用。Sir2基因在哺乳类动物中有7个同源基因，分别被命名为SIRT1至SIRT7。其中，SIRT3、SIRT4及SIRT5位于线粒体，其中小鼠中的研究发现以SIRT3在线粒体内的去乙酰化活性最为明显。本研究在前人获得猪SIRT3基因CDS序列的基础上，构建亚细胞定位载体，超表达载体。并设计了RNAi序列，筛选了最有效的干扰序列。并在不同的应激条件下，测定了SIRT3超表达细胞及对照细胞的线粒体膜电位分布。取得如下研究结果：　　 1.获得pSIRT3基因的CDS序列，构建了亚细胞定位载体，定位结果显示pSIRT3蛋白分布于线粒体。　　 2.设计RNAi序列，干扰结果显示Ri7片段的效果最好，干扰效率达到80～90％。　　 3.筛选得到了pSIRT3的超表达细胞，经real-time PCR检测，其表达量约为对照组的15倍，超表达效果明显。　　 4.在不同的应激条件下，对实验组的超表达pSIRT3的细胞、对照组的空载体细胞以及空白组的细胞进行线粒体膜电位的检测。结果显示，超表达pSIRT3后的细胞在TPA及MMS的应激条件下，对维持线粒体高膜电位具有一定的促进作用。