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长茎葡萄蕨藻(Caulerpa lentillifera)是一种具有高营养价值的食用绿藻。目前国内外针对温度、光照强度、盐度和营养盐等环境因子对长茎葡萄蕨藻生长的影响已做了大量的研究,但有关长茎葡萄蕨藻无机碳利用以及添加外源碳源对长茎葡萄蕨藻生长、生化组分等的研究尚未见报道。因此,本研究在验证长茎葡萄蕨藻能利用HCO3-的基础上,进一步通过添加抑制剂研究不同温度下长茎葡萄蕨藻利用HC03-的途径;其次研究两种光质下添加无机碳源NaHC03对长茎葡萄蕨藻生长、生化组分、抗氧化系统以及营养盐吸收的影响;最后对长茎葡萄蕨藻培养过程中NaHC03浓度、光照强度、温度及硝氮浓度进行优化。从而得到有利于长茎葡萄蕨藻生长的理化条件,以期为长茎葡萄蕨藻规模化人工栽培提供理论基础,也可为其它大型绿藻利用NaHC03作为外源无机碳源提供理论参考。主要研究结果如下:1、运用pH漂移技术,探索藻体质量、藻体部位、光照强度和海水体积对长茎葡萄蕨藻的pH补偿点的影响,并研究在3种不同温度(20、25、30℃)下,利用4,4’-二异硫氰基芪2,2’-二磺酸(DIDS)、乙酰唑胺(AZ)、乙氧苯丙噻唑磺胺(EZ)、钒酸盐(Van)4种抑制剂对长茎葡萄蕨藻无机碳的利用影响。结果表明:藻体质量、藻体部位、光照强度和海水体积对长茎葡萄蕨藻的pH补偿点均无显著性影响(P>0.05),在一定范围内藻体质量或光照强度越大,达到pH补偿点时间越短,且pH补偿点均大于9。20℃下各抑制剂的抑制作用最大,其次为30℃,25℃最小,但3种温度下各抑制剂的抑制率无显著差别(P>0.05)。4种抑制剂中DIDS对长茎葡萄蕨藻pH补偿点和无机碳利用均无显著影响(P>0.05),剩余3种抑制剂的抑制作用依次为EZ>AZ>Van。说明藻体质量、藻体部位、光照强度和海水体积对长茎葡萄蕨藻pH补偿点无影响。温度对长茎葡萄蕨藻吸收利用无机碳没有明显影响。此外长茎葡萄蕨藻能利用HCO3-作为无机碳源进行光合作用,且以胞外碳酸酐酶(CA)的途径为主,但不能通过DIDS敏感机制直接吸收海水中的HC03-。2、研究两种光质下(蓝红光(5:1)、白光)添加不同NaHC03浓度(0、1、2、4、6、8、10 mmol·L-1)对长茎葡萄蕨藻生长、生化组分、抗氧化系统以及营养盐吸收的影响。结果表明:两种光质下添加NaHC03对原直立枝的生长、可溶性蛋白含量、总N含量和C/N无显著影响(P>0.05),此外再生匍匐茎的生长,在白光添加不同NaHC03浓度处理下亦无显著差异(P>0.05)。而长茎葡萄蕨藻的比生长速率(SGR)、再生直立枝重量和长度、光合色素含量、可溶性糖含量、NO3与P043-吸收速率和硝酸还原酶活性在两种光质下变化趋势一致,均随着NaHCO3添加浓度的增加先上升后下降,分别在白光添加6 mmol.L-1 NaHCO3组、蓝红光添加4 mmol·Il1 NaHCO3组有最大值,且显著大于对照组(P<0.05)。且在白光添加6 mmol.L-1 NaHCO3组、蓝红光添加4mmol·L-1NaHCO3组丙二醛(MDA)含量、总超氧化物歧化酶(T-SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性最低,添加8、10 mmol·L-1 NaHCO3时两种光质下的MDA含量、T-SOD和CAT活性明显增加。可见添加适宜浓度的NaHCO3有利于长茎葡萄蕨藻的生长、生化组分的积累以及营养盐的吸收。综合分析得出长茎葡萄蕨藻在白光、蓝红光下培养的最适NaHCO3添加浓度分别为6 mmol·L-、4mmollL-。3、为了优化长茎葡萄蕨藻的培养条件,在白光下选取NaHCO3浓度、光照强度、温度及硝氮浓度四种理化因子进行四因素三水平正交实验考察它们对长茎葡萄蕨藻生长和生化组分的影响。结果表明:在NaHCO3浓度为5mmol·L-1,光照强度为3000±1000 1x,温度为30℃,氮浓度为7 mg·L-1的条件下长茎葡萄蕨藻的SGR最大。在NaHCO3浓度为7mmol.L-1,光照强度为3000±1000 1x,温度为27.5℃,氮浓度为7 mg.Ll1的条件下长茎葡萄蕨藻的再生直立枝最长。从长茎葡萄蕨藻整体生长和再生直立枝的生长综合考虑得出,NaHCO3浓度为6mmol·L-1,光照强度为3000±10001x,温度为27.5℃,氮浓度为7mg·L-1的条件为长茎葡萄蕨藻最适生长条件。在NaHCO3浓度为7mmol·L-1,光照强度为3000±10001x,温度为25℃,氮浓度为15 mg·L-1的条件下长茎葡萄蕨藻的可溶性糖含量最大。在NaHCO3浓度为6±1mmol.L-1,光照强度为3000±1000 1x,温度为25℃,氮浓度为1mg·L-1的条件下长茎葡萄蕨藻的可溶性蛋白含量最大。综合分析得出,NaHCO3浓度为7 mmol·L-1,光照强度为3000±1000 1x,温度为25℃,氮浓度为15m·L-1的条件为长茎葡萄蕨藻最适生化组分积累条件。