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高脂膳食已经成为中国和欧美等国家的主要饮食方式,由高脂膳食引起的肥胖,成为全球性的健康问题。研究发现,肥胖常导致非酒精性脂肪肝(Nonalcoholic Fatty Liver Disease,NAFLD)的发生:肥胖首先引起肝脏单纯脂肪变性,随着肝细胞内脂肪积累,逐渐形成非酒精性脂肪肝炎,甚至发展为肝硬化、肝癌。但肥胖诱导NAFLD的具体发病机制尚未明确,且目前尚无有效的治疗方法。肠道菌群失调所引起的炎症反应和自身免疫状态的改变与人体肝脏氧化应激相关,在NAFLD发病机制起重要作用。基于多重打击理论,相关的临床和实验证据表明“肠—肝轴”与NAFLD的发展密切相关,并为NAFLD的预防和治疗提供了新的思路。本研究采用课题组已筛选出的对高脂膳食诱导Balb/c小鼠肥胖有明显抑制作用的益生菌株乳杆菌T3,并以水溶性膳食纤维益生元菊粉作为阳性对照,研究其对高脂膳食肥胖NAFLD小鼠基础指标和生化指标的影响;对高脂膳食引起的肝脏氧化应激及炎症反应的影响;探究其调节肥胖NAFLD小鼠肠道内菌群以及降低LPS浓度的作用;检测肥胖NAFLD小鼠肠上皮紧密连接蛋白表达,进而验证益生菌和益生元是否通过“肠—肝轴”途径改善肥胖引发的肝损伤。给予高脂膳食小鼠灌胃乳杆菌T3和菊粉6周后,能够显著改善肥胖小鼠基础指标和TG、TC、LP等生化指标,使其恢复到正常水平,P<0.05。结合小鼠肝脏氧化应激MDA、AST和ALT相关指标以及肝脏HE染色,发现乳杆菌T3和菊粉干预能够缓解NAFLD小鼠肝脏内脂肪堆积,并改善高脂膳食对小鼠造成的肝脏损伤。对小鼠肝脏Nrf2抗氧化通路相关表达因子进行RT-PCR分析,发现菊粉干预可以显著上调Nrf2通路相关因子,激活抗氧化酶系表达并抑制高脂膳食小鼠肝脏内氧化应激,P<0.05;但乳杆菌T3只能显著增加BSEP基因表达,P<0.05乳杆菌T3可能是通过胆汁酸循环途径,改善高脂膳食引起的氧化—抗氧化不平衡。对小鼠肝脏LPS/TLR-4通路以及结肠紧密连接蛋白进行RT-PCR分析,发现乳杆菌T3和菊粉干预能显著降低小鼠肝脏LPS浓度和TLR-4下游NF-кB相关炎症因子表达,P<0.05;乳杆菌T3和菊粉干预能显著增加小鼠结肠组织紧密连接相关蛋白基因表达,P<0.05,并结合结肠HE染色,我们推测乳杆菌T3和菊粉干预是通过“肠—肝轴”途径改善高脂膳食对NAFLD小鼠的炎症功能障碍。通过高通量测序方法对小鼠肠道菌群多样性进行分析。乳杆菌T3和菊粉干预均能改变高脂膳食小鼠肠道内菌群组成,提高小鼠肠道内菌群多样性,提高拟杆菌门与厚壁菌门的比值。属水平上可以看出,乳杆菌T3和菊粉干预后,小鼠肠道内产乙酸和丁酸菌属显著增加,P<0.05,产短链脂肪酸菌属可能是影响高脂膳食NAFLD小鼠肝损伤的关键菌属。