基因治疗促进兔下颌骨牵张成骨新骨生成及新生骨评价的实验研究

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目的建立兔下颌骨hBMP-2基因修饰兔BMSCs牵张成骨的动物模型,研究基因治疗对兔下颌骨牵张成骨新骨生成是否有促进作用,从而为研究如何缩短牵张成骨治疗周期提供一种理论依据。材料与方法选用健康新西兰大白兔36只,随机分成3组:实验组(注射hBMP-2基因修饰的BMSCs)、对照组(注射BMSCs)、空白组(注射生理盐水),每组12只。于右侧下颌骨行骨皮质切开,并于颊侧安装小型牵张器,建立兔下颌骨牵张成骨动物模型。术后第6天开始牵张,每天牵张1mm,共牵开7mm,随即进入固定期(Consolidation Period)。在固定期第1天,实验组于牵张间隙处注射200μL hBMP-2基因修饰的兔BMSCs,对照组和空白组分别注射200μ L兔BMSCs和生理盐水,随后分别于固定期2W、6W处死动物,拍摄X线片,对比观察X线片骨质愈合的情况,并行HE染色等对比观察新骨形成的情况,测试其Ca/P比值比较各组新生骨矿化程度,进行三点弯曲试验以测试其机械强度。结果所有动物均顺利完成实验,3组动物分别于固定期2W、6W处死,取标本,拍摄X线片,发现牵张区的新生骨骨密度X线影像表现实验组较对照组空白组高,对照组和空白组无明显差异,三组动物牵张区新骨密度X线影像表现均随着固定周期的延长而逐渐增加;HE染色观察实验组新生骨骨小梁出现、成熟早于其他两组,Ca/P检测实验组明显高于对照组和空白组(P<0.05),对照组与空白组无明显差异(P>0.05):各组标本牵张成骨新生骨三点弯曲试验显示实验组新生骨组织机械强度明显强于对照组和空白组。结论兔下颌骨hBMP-2基因修饰兔BMSCs牵张成骨外科模型是可行的,注射hBMP-2基因修饰的兔BMSCs的实验组兔下颌骨牵张区新生骨形成较对照组和空白组较快,可见用hBMP-2基因修饰的兔BMSCs是能够有效促进兔下颌骨牵张区新骨形成的,从而为临床上缩短牵张成骨的治疗周期提供了理论依据。
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