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【目的】为探讨ROS在脊髓损伤病理发生过程中的作用及其分子机制，一定浓度H2O2作用于PC12细胞模拟其氧化应激状态，制作细胞凋亡模型；通过P13K特异性抑制剂LY294002预处理，研究PI3K／Akt信号通路活化在H2O2诱导的PC12细胞凋亡中的作用及其作用机制，为脊髓损伤临床治疗（如抗氧化治疗、筛选ROS相关信号通路新药物靶点）提供新途径。 【方法】不同浓度H2O2作用于PC12细胞24h，及H2O2作用前用PI3K特异性抑制剂LY294002（20μM）预处理1h，通过MTT法检测，LY294002预处理前后不同浓度H2O2处理对细胞增殖抑制率的影响；分别用100μM和200μMH2O2作用于PC12细胞24h，制作细胞凋亡模型；经Hoechst33342／PI核荧光双染、DNA片段化分析和流式细胞术检测LY294002预处理对细胞凋亡的影响，以确定P13K活化在H2O2诱导的PC12细胞凋亡的作用；为进一步研究PI3K／Akt信号通路的作用机制，利用Western blot技术检测LY294002预处理前后凋亡相关蛋白CPP32、凋亡调节蛋白Bcl-2家族中Bcl-2、Bad、和Bcl-XL蛋白表达变化及Bad磷酸化情况。 【结果】1．MTT结果显示，50～200μM H2O2处理PC12细胞增殖抑制率随处理浓度增加而递增；LY294002预处理后细胞增殖抑制率明显高于相应的H2O2处理组。2．用H2O2（100μM或200μM）处理细胞24h，用Hoechst33342／PI核双染，荧光显微镜下观察，部分细胞核呈现典型的凋亡特征；LY294002预处理使凋亡细胞数明显增加，从（17.5±1.3）％和（29±2.1）％增加到（31±2.6）％和（44±3）％（P＜0.05）；DNA凝胶电泳显示特征性“梯状条带”，且LY294002