西藏“雪莲”共生菌粒的分离鉴定与特性研究

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近几年,在广东等地民间流传着一种叫做西藏“雪莲”的共生菌粒,据说来源于西藏的某个和尚庙,由波兰的一位医学教授传出。这种菌粒发酵产生的乳制品具有良好的保健与治疗作用,且制作和菌体增殖工艺简单。据分析,这种菌粒类似于开菲尔粒。 该项研究对西藏“雪莲”共生菌粒进行了初步的分离与鉴定,探讨了各分离纯菌的发酵及生物学特性,并对其药理及毒理作用进行了初步的探讨。为进一步研究共生菌的共生条件及对其保健作用做出更深入的研究和验证奠定了理论基础,并可指导民间对西藏“雪莲”发酵乳制品的正确培养与合理食用。 从西藏“雪莲”共生菌粒中分离得到三株纯菌:XR、LM和XA。经过初步鉴定,菌株XR属于乳酸菌中的乳杆菌属短乳杆菌种;菌株LM属于酵母菌中的毕赤酵母属;菌株XA属于醋酸菌中的葡糖杆菌属。 乳酸菌XR为革兰氏阳性的兼性厌氧菌。其生长适宜的初始pH值在5.0左右,适宜生长温度大约为38℃。采用正交实验,确定其最佳培养基配方为:葡萄糖1.5%,乳糖0.5%,大豆蛋白胨1%,酵母浸膏0.5%,牛肉浸膏0.5%,K2HPO40.2%,柠檬酸三铵0.2%,乙酸钠0.5%,MgSO4·7H2O0.058%,MnSO4·4H2O0.025%,番茄汁10%。 XR具有较强的耐酸、耐胆盐、耐肠胃运转以及降胆固醇的能力。其在pH分别为4.0、3.0、2.0的HC1中处理1.5h后,存活率分别为98.21%、86.9%和49.52%;处理3h后,存活率分别为95.83%、68.45%和21.9%。XR可以耐0.5%左右的胆盐。其在模拟胃液中处理1.5h和3h后,存活率分别为71.45%和30.26%;在模拟肠液中处理1.5h和3.0h后,存活率分别为78.95%和41.32%。在其培养过程中对培养基中胆固醇的脱除率可以达到45%左右。 酵母菌LM生长适宜的初始pH值在5.0左右,适宜生长温度大约为30℃。其在pH分别为4.0、3.0、2.0的HC1中处理1.5h后,存活率分别为99.07%、82.24%和30.56%;处理3h后,存活率分别为97.66%、54.17%和20.47%。LM可以耐0.3%左右的胆盐。其在模拟胃液中处理1.5h和3h后,存活率分别为84.43%和57.38%;在模拟肠液中处理1.5h和3h后,存活率分别为60.66%和22.95%。LM对培养基中的胆固醇无同化作用。 醋酸菌XA为革兰氏阴性的严格好氧菌。其生长的适宜初始pH值在4.0左右,生长的适宜温度大约为30℃。 抑菌实验表明:酵母菌对致病性大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌均有很强的抑制作用,雪莲发酵乳的抑菌作用稍弱,乳酸菌对三种指示菌均无抑制作用。起到抑菌作用的均为菌液,菌体无抑菌作用。 西藏“雪莲”发酵乳的急性毒理实验结果:LD50>15000mg/kg体重,证实为无毒。
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