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目的越来越多的研究表明,电针疗法有抗过敏和抗炎作用,但对于迟发性超敏反应(DTH)的作用机制不明。本研究旨在通过观察电针对小鼠DTH治疗效果,试探讨电针足三里防治Th1介导的DTH的效应机制。方法使用雌性C57BL/6小鼠,共32只,体重约为18-20g,将小鼠通过编号查询随机数字表随机分为对照组8只、模型组(OVA-DTH组)8只、电针治疗组(DTH+EA组)8只、假电针组(DTH+Sham组)8只共4组。测量小鼠足垫厚度,使用苏木精和伊红(HE)染色观察足垫炎性细胞浸润情况;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清OVA特异性抗体IgG和IgE水平,并检测足垫组织匀浆上清炎症细胞因子(IFN-γ,TNF-α,IL-4和IL-5)水平;流式细胞仪检测各组脾脏CD4~+IFN-γ+T细胞和CD4~+IL-4+T细胞数;蛋白质印迹法检测脾脏分离纯化的T细胞T-bet与GATA-3蛋白表达,并比较各组间的差异。结果通过组织形态学观察,与模型组相比,电针治疗组能明显减小OVA导致的小鼠足垫厚度(P<0.05),假电针组与模型组相比无明显差异(P>0.05);电针治疗组小鼠足垫组织真皮层炎性细胞浸润与聚集水平明显低于模型组(P<0.01),假电针组与模型组相比无明显差异(P>0.05);与模型组比较,电针治疗组可显著减轻OVA导致的小鼠足垫表皮层肿胀(P<0.05)。通过酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测,与模型组相比,电针治疗组可显著抑制血清OVA特异性抗体IgG水平和IgE水平(P<0.01),假电针组与模型组相比无明显差异(P>0.05);与模型组比较,电针治疗组小鼠足垫组织Th1类细胞因子水平(如IFN-γ和TNF-α)显著降低(IFN-γ:P<0.05,TNF-α:P<0.01),假电针组与模型组相比无明显差异(P>0.05);对比模型组,电针治疗组和假电针组小鼠足垫组织Th2类细胞因子(IL-4,IL-5)水平无显著差异(P>0.05)。通过流式细胞学的检测,与对照组比较,模型组中脾CD4~+IFN-γ+T细胞明显增加(P>0.05),同时与对照组、模型组相比,电针治疗组脾CD4~+IFN-γ+T细胞数量明显降低,差异具有统计学意义(P<0.01),假电针组与模型组相比无明显差异(P>0.05);而对比对照组、模型组和电针治疗组三组间脾CD4~+IL-4+T细胞计数水平无明显差异(P>0.05);依据脾CD4~+IFN-γ+T细胞和脾CD4~+IL-4+T细胞计数的变化水平,与对照组、模型组相比,电针治疗组的DTH小鼠脾Th1/Th2细胞比率(即脾CD4~+IFN-γ+T细胞数/脾CD4~+IL-4+T细胞数)降至正常值附近,且与模型组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。通过蛋白质印迹法(Westen blot)检测,与对照组比较,模型组T-bet蛋白活性增强,而电针治疗组T-bet蛋白活性减弱,对GATA-3则无显著影响(P>0.05);通过T-bet/GATA-3比率的统计分析,电针治疗组与模型组相比,电针治疗组比率明显低于模型组(P<0.05),假电针组与模型组无明显差异(P>0.05)。结论1.电针“足三里”对OVA诱导的小鼠DTH炎症具有明显的抑制作用。2.电针“足三里”可通过减少IFN-γ的转录因子T-bet蛋白的表达,重建Th1/Th2平衡,改善Th1介导的过敏性皮肤炎症。3.电针“足三里”可作为过敏性炎症和Th1介导的炎症反应的有效疗法。