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己糖激酶(hexokinase,HK)可与线粒体膜通透性转化孔(mitochondrial permeability transition pore,MPTP)相互作用,参与调控MPTP的开放,从而参与介导细胞凋亡,但是其在植物中的作用机理尚不明确。一氧化氮(nitric oxide,NO)作为一种植物生理信号小分子,参与介导了植物中的众多生理活动,参与调控线粒体的功能、呼吸作用和糖酵解代谢。在采后果实的贮藏过程中,外源NO能够延缓果实的衰老、延长果实的贮藏时间。探讨NO对HK蛋白的作用方式及对己糖代谢调控机理有助于明确HK蛋白及己糖代谢对肥城桃果实采后保鲜的影响,对明确NO延长果实贮藏时间的机理有重要意义。本论文以品种为“大红袍”肥城桃果实作为实验材料。通过从NCBI查找的碧桃HKⅡ部分基因保守片段,经过引物设计和基因克隆后,测序后与肥城桃果实序列比对后完全吻合。在此基础上进行了RACE实验和巢式PCR后,得到HKⅡ基因全长为1835个碱基,其中完整的阅读框中有1496个碱基,编码497个氨基酸。通过生物信息学技术分析得到HKII蛋白为疏水性跨膜蛋白,由15段α螺旋和11段β折叠和无规则卷曲构成,分子量为50 kDa。氨基酸序列同源性分析和系统进化树表明,HKⅡ蛋白具有较高的保守性,其中与枇杷的同源性最高,高达96.58%。TMHMM跨膜结构预测HKII为跨膜蛋白,有1次跨膜,绝大部分在膜外。NO与HKII蛋白的荧光光谱显示,NO可与HKII蛋白发生静态猝灭,生成1:1的复合物。对HKⅡ基因谷胱甘肽化和硝基化建模分析可知其外部有四个半胱氨酸和12个酪氨酸,根据键能分析,谷胱甘肽化反应比亚硝基化反应更容易进行。外源NO对肥城桃果实己糖代谢的生理生化的研究表明:在贮藏前期,与对照相比,15μmol L-1 NO处理的桃果实的蔗糖的含量明显下降,同时提高了AI、NI、HK、SS(分解方向)的活性和HKⅡ的基因表达量,提高了蔗糖消耗的速率,并且NO提高了HK和FRK的活性,从而提高了糖酵解的速率,从而为呼吸跃变提供能量;在贮藏后期,15μmol L-1 NO处理的桃果实的己糖含量下降,15μmol L-1 NO提高了FRK、SPS的活性,同时降低了HK、PGI的活性和HK的基因表达,而NO清除剂c-PTIO则提高了果糖和葡萄糖的含量,同时提高了SPS和PGI的活性,这表明在贮藏后期NO处理限制了果实糖酵解的速率,延长了果实的保鲜期。