甾体类药物是医药行业中产量仅次于抗生素的第二大类药物。甾体激素药物生产中,甾体母核的多个基团需要进行修饰,甾体微生物C11α-羟基化反应是重要的甾体转化反应之一。本文对黑根霉的C11α-羟基化反应进行了研究,确定了羟化反应最佳营养条件和工艺条件,探讨了碳源和转化期pH条件对黑根霉的C11α-羟基化转化过程的影响,为解决羟基化转化过程中溶氧不足的问题讨论了补水工艺。论文通过实验确定了羟基化反应的工艺条件:最佳培养基配比（组分g/L）为葡萄糖30,玉米浆25,硫酸铵1.6,蚕蛹粉3;溶料配比为沃氏物（16α,17α-环氧黄体酮）:乙醇:水=2:1.8:4.3;菌体培养22h一次投料。发酵培养基中按4g/L添加二甲基亚砜（DMSO）转化结果较好,摇瓶转化率达35.8%。发酵培养基中按5g/L添加Tween80,摇瓶转化率达35.1%,投料时按3g/L添加Tween80,摇瓶转化率达35.3%。黑根霉对甾体的羟基化转化过程中存在葡萄糖抑制问题,采用混合碳源C（葡萄糖:糊精为1:1）缓解了葡萄糖抑制作用,100L发酵罐试验转化率较对照提高了2%。100L发酵罐实验结果,投料时调pH值至6.0,转化期pH维持在4.0-5.0,转化率比对照提高了3%。黑根霉对甾体的C11α-羟基化转化过程中存在溶氧不足的问题,经实验确定了补水调pH工艺。7L自动发酵罐装液3.5L,培养18h时补水1.5L并调pH至6.0,培养22h投入甾体底物,C₁₁α-羟基化转化率达到52.4%,转化率比原工艺提高了5%。