咖啡因干预下EAE小鼠中枢及外周淋巴细胞亚群的比例变化

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目的:观察咖啡因干预下EAE小鼠中枢及外周淋巴细胞亚群的比例变化,探讨慢性咖啡因干预对EAE发病过程中细胞及体液免疫的影响。  方法:用MOG35-55免疫诱导雌性C57BL/6小鼠制作EAE模型,各咖啡因干预组在EAE不同时相(EAE造模前、EAE全程、EAE潜伏期、EAE发病期)给予30mg/kg咖啡因饮水干预。记录小鼠行为学变化,HE染色观察CNS炎症组织病理变化,使用流式细胞仪检测小鼠中枢及外周脾脏淋巴细胞中CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD4+CD25+、CD4+CD39+、CD4+CD73+、B220+细胞亚群的比例变化情况。  结果:1、与EAE对照组相比,咖啡因全程干预组及发病期干预组小鼠潜伏期延长(P<0.05),全程干预组小鼠最大症状评分减轻(P<0.05)。而且病理评分全程干预组(P<0.01)及发病期干预组(P<0.05)较EAE对照组减轻。2、EAE对照组小鼠中枢神经系统有CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD4+CD25+、CD4+CD39+、CD4+CD73+、CD4+CD73+、B220+淋巴细胞的浸润, CFA阴性对照组中枢神经系统未检测到淋巴细胞浸润。与CFA阴性对照组相比,EAE对照组小鼠外周脾细胞中CD3+CD4+、CD4+CD73+细胞减少(P<0.01); B220+细胞明显升高(P<0.05);CD3+CD8+、CD4+CD25+、CD4+CD39+细胞有下降趋势但未达统计学差异;3、与EAE对照组相比,全程干预组(P<0.01)及发病期干预组(P<0.05)中枢神经系统CD3+CD4+细胞明显降低,而造模前干预组CD3+CD4+细胞升高较明显(P<0.05);造模前干预组及潜伏期干预组中枢CD4+CD73+淋巴细胞升高(P<0.05),全程干预组及发病期干预组则有下降趋势;全程干预组中枢CD39+CD73+细胞升高(P<0.05)。与EAE对照组相比,全程干预组外周CD4+CD25+、CD4+CD39+、CD4+CD73+淋巴细胞较EAE对照组明显升高(P<0.01)。  结论:30mg/kg咖啡因全程干预组及发病期干预组对EAE小鼠神经功能有保护作用。其作用可能是通过下调进入中枢神经系统的CD3+CD4+、CD4+CD73+淋巴细胞,而上调CD39+CD73+淋巴细胞实现的。
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