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[目的]探讨锝亚甲基二膦酸盐(Technetium methylene diphosphonate,99Tc-MDP)对骨肉瘤(Osteosarcoma,OS)细胞MG63的影响及其相关机制,为其临床治疗骨肉瘤提供理论依据。[方法]采用不同浓度的99Tc-MDP作用于骨肉瘤细胞MG63,通过2-(2-甲氧基-4硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐(Cell Counting Kit-8,CCK-8)法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期,免疫细胞化学(Immunocytochemistry,ICC)及免疫蛋白印迹(Western blot,WB)检测骨保护素(Osteoprotegerin,OPG)、核因子κ B受体活化因子(Receptor activator of NF-κ B,RANK)、核因子 κ B 受体活化因子配体(Receptor activator of NF-κ B Ligand,RANKL)蛋白的表达情况。[结果]1、与对照组相比,100μg/mL99Tc-MDP对骨肉瘤MG63细胞生长具有轻度促进增殖作用,但随着作用时间延长,药效显现而转为轻度抑制作用,差异具有统计学意义(P<0.01),在(200,300,400,500,600)μg/mL范围内,99Tc-MDP对骨肉瘤MG63细胞均具有抑制作用,并呈浓度剂量依赖关系(P<0.01)。2、对照组,100μg/mL和400μg/mL凋亡率分别为0.1 87±0.061%,10.507±1.092%,22.787±0.556%,99Tc-MDP 对骨肉瘤细胞 MG63 具有促进凋亡作用,差异皆具有统计学意义(P<0.01)。3、99Tc-MDP对其周期的影响主要呈现G1期阻滞,并存在剂量依赖性,100μg/mL 99Tc-MDP浓度组与对照组之间差异无统计学意义(P>0.05),400μg/mL 99Tc-MDP浓度组与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.01)。4、骨肉瘤细胞MG63中存在相关蛋白OPG,主要表达于胞浆,与对照组相比,100μg/mL99Tc-MDP和400μg/mL 99Tc-MDP对骨肉瘤MG63细胞中OPG的表达均降低,差异皆有统计学意义(P<0.01)。5、100μg/mL 99Tc-MDP和400μg/mL99Tc-MDP对骨肉瘤MG63细胞中OPG的表达与对照组比较,均具有抑制作用,前者差异无统计学意义(P>0.05),后者差异具有统计学意义(P<0.01)。与对照组相比,100μg/mL 99Tc-MDP对骨肉瘤MG63细胞中RANK的表达,具有促进作用,400μg/mL 99Tc-MDP对骨肉瘤MG63细胞中RANK的表达,具有抑制作用,差异皆具有统计学意义(P<0.01)。与对照组相比,100μg/ml 99Tc-MDP对骨肉瘤细胞MG63内RANKL的表达具有抑制作用,差异有统计学意义(P<0.01),400μg/ml 99Tc-MDP对骨肉瘤细胞MG63内RANKL的表达具有促进作用,差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组相比,100μg/mL99Tc-MDP对骨肉瘤MG63细胞中OPG/RANK的表达比值降低,400μg/mL99Tc-MDP对骨肉瘤MG63细胞中OPG/RANK的表达比值上升,差异皆具有统计学意义(P<0.01)[结论]高浓度99Tc-MDP对骨肉瘤MG63细胞增殖具有抑制作用,而低浓度99Tc-MDP在早期对骨肉瘤MG63细胞生长具有轻度促进增殖作用,但随着作用时间延长,药效显现而转为轻度抑制作用,并呈浓度和时间依赖性。高浓度99Tc-MDP可诱导骨肉瘤MG63细胞发生凋亡和周期阻滞。骨肉瘤MG63细胞中存在相关蛋白OPG,主要表达于胞浆中。高浓度99Tc-MDP能有效抑制骨肉瘤MG63细胞中RANK的表达。