研究背景尿路感染（Urinary Tract Infection,UTI）是泌尿外科常见疾病和应用抗菌药物的主要原因;属于祖国医学“淋证”范畴。其中,尿源性致病大肠杆菌（Uropathogenic Escherichia coli,UPEC）是UTI的主要致病菌。抗菌药物耐药是全球健康的威胁之一,多重耐药生物体是UTI管理的挑战。近几十年来,UPEC的耐药和多重耐药是一个临床问题;其中喹诺酮类药物耐药处于前列,与基因突变相关。中医药治疗UTI的研究和发表呈现上升趋势且在减少抗菌药物使用或减少耐药菌株产生方面发挥着重要作用。急性单纯性膀胱炎是UTI的主要类型,为临床常见病种,中医药作为一种独立干预或与抗生素结合使用的干预手段,可能有助于防治感染。三金片是临床常用于治疗急性单纯性下尿路感染的中成药,具有镇痛、抑炎等疗效,体内外实验均证实其能有效治疗UPEC所致UTI。基于此,课题组开展三金片治疗急性单纯性下尿路感染（下焦湿热证）的随机、双盲、阳性药、平行对照、多中心临床研究,对临床疗效及尿液样本进行研究并开展相对应的临床试验检测及动物实验样本相关指标的检测,以探析三金片治疗机制。第一部分 三金片治疗急性单纯性下尿路感染（下焦湿热证）的临床研究目的:通过随机、双盲、阳性药、平行对照、多中心临床研究,评价三金片治疗急性单纯性下尿路感染（下焦湿热证）的有效性,并通过对临床尿液样本的检测,探析药物缓解疼痛等机制及相关指标的关联性。方法:分析2018年4月至2019年12月中国中医科学院西苑医院等4个中心的180例急性单纯性下尿路感染（下焦湿热证）患者的临床资料,比较三金片、左氧氟沙星、联合用药在临床疗效及安全性方面是否存在差异以及通过对尿液样本开展疼痛及复发相关检测,评估相关指标临床应用的可行性。其中,对入组影响疗效的变量进行倾向性评分,在匹配的基础上分析各组资料。对治疗前的检测指标及影响结局的变量进行倾向性评分,在匹配的基础上对两定性变量关联性进行交叉（卡方）分析。对临床结局为二分类定性变量的影响疗效的主要因素进行二元Logistic回归分析;对临床结局为定量变量的影响疗效的主要因素进行线性分析,其中符合共线性的定量数据进行Ridge回归分析。结果:1.与左氧氟沙星比较,三金片临床症状治愈、尿液分析检查复常、综合疗效治愈均无统计学差异;与联合用药比较,三金片临床症状治愈具有统计学差异,尿液分析检查复常、综合疗效治愈具有显著统计学差异;与左氧氟沙星比较,联合用药临床症状治愈无统计学差异,尿液分析检查复常、综合疗效治愈具有统计学差异。2.药物治疗改善疼痛与Substance P改变无关联性;药物治疗对IL-5水平的影响与复发情况无关联性。回归分析表明:Substance P、IL-5与病情严重程度等级、中医症状分级量化等级、膀胱过度活动症尿急单项等级、疼痛等级、尿白细胞（尿沉渣）、临床症状治愈、尿液分析复常、综合疗效治愈等均无关联性。结论:1.三金片、左氧氟沙星、联合用药均能有效治疗急性单纯性下尿路感染（下焦湿热证）。其中,三金片和左氧氟沙星在临床症状、尿液、综合疗效方面无明显差异;三金片在临床症状、尿液、综合疗效方面优于联合用药;左氧氟沙星在尿液、综合疗效方面优于联合用药。2.药物治疗后尿液中Substance P的变化不能很好的反应临床尿痛症状的改善情况;药物治疗后尿液中IL-5的变化不能很好的预测尿路感染综合治愈后复发的情况。第二部分三金片治疗急性尿路感染对炎症、疼痛相关通路以及尿路屏障的影响目的:运用经典的Murine急性尿路感染动物造模方法,通过治疗性干预,系统评价三金片对急性单纯性下尿路感染的药效作用及机制,探析三金片与抗菌药物、联合用药的差异。方法:按体重排序编号,采用区组随机化将200只C57BL/6雌性小鼠随机分成正常组、模型组、三金片组、左氧氟沙星组、联合用药组,每组40只。通过细菌培养,使用比浊仪配制50μL内含≥2×108CFU的UPEC CFT073;分别于第1天及第3天通过尿道插管向6～9周龄的C57BL/6雌性小鼠膀胱内注入细菌混悬液,通过检测尿液UPEC CFT073≥104CFU/mL确定造模成功,再通过三金片、左氧氟沙星、联合用药干预急性尿路感染C57BL/6雌性小鼠;从尿液细菌、膀胱粘附细菌、膀胱细胞内细菌菌落探析药物治疗对体内细菌定植的影响;从组织病理学及脏器指数探析药物治疗对病理的影响及毒力作用;从IL-1 β-p38MAPK-NF-κ B及IL-1 β-TLR4-NF-κ B探析药物治疗对炎症的影响;从IL-1β-TLR4-SP/NK1R探析药物治疗对疼痛的影响;从电镜、蛋白及基因表达量探析药物治疗对膀胱黏膜上皮紧密连接蛋白的影响。结果:1.药物干预1天后,三金片、左氧氟沙星、联合用药在对尿液细菌的抑制和杀灭治疗作用无差别;药物干预3天、5天后,左氧氟沙星、联合用药在尿液细菌、膀胱粘附细菌、膀胱细胞内细菌方面治疗作用显著且联合用药在尿液细菌、膀胱粘附细菌方面效果更明显,左氧氟沙星在膀胱细胞内细菌方面治疗作用更明显;三金片在尿液细菌、膀胱粘附细菌方面均有治疗作用,其中以尿液最为明显。2.三金片、左氧氟沙星、联合用药治疗3天、5天均对膀胱无损伤且存在修复作用;左氧氟沙星对组织病理恢复疗效最佳,联合用药优于三金片。3.三金片、左氧氟沙星、联合用药治疗5天均能有效降低IL-1 β、IL-10水平,三金片能有效降低IL-5水平;三金片、左氧氟沙星、联合用药治疗5天均能有效降低TRL4、p38MAPK蛋白表达,升高NF-κ B蛋白表达;降低Occludin、Claudin-2蛋白基因表达及上调Occludin、Claudin-2蛋白上皮表达,改善膀胱黏膜上皮紧密连接及上皮细胞细胞内部结构;未明显改善NK1R、Substance P蛋白相对表达量。结论:三金片、左氧氟沙星、联合用药均能治疗急性尿路感染。三金片对尿液细菌的抑制和杀灭作用最为显著,对膀胱粘附细菌存在一定抑制和杀灭作用。其中,左氧氟沙星治疗作用最显著;联合用药疗效不如单用左氧氟沙星,可能跟紧密连接蛋白的表达相关。除此之外,三金片、左氧氟沙星、联合用药在改善疼痛指标方面无差别。其中,三金片可能能降低膀胱组织的免疫反应,降低过敏等反应。综上所述,三金片治疗急性单纯性下尿路感染（下焦湿热证）临床试验表明:三金片能有效治疗急性单纯性下尿路感染（下焦湿热证）;三金片治疗急性单纯性下尿路感染动物实验表明:左氧氟沙星疗效最显著;联合用药优于三金片,但不及单用左氧氟沙星。其中,动物实验与临床存在部分疗效差异,可能是由于人与实验动物的种属差异以及菌种敏感差异所导致。临床试验及动物实验对三金片治疗急性单纯性下尿路感染（下焦湿热证）的机制探析,将为临床中药防治尿路感染的相关研究提供思路上参考。