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第一部分目的:研究B细胞成熟抗原（B cell maturation antigen,BCMA）在不同浆细胞疾病中的表达,并进一步在多发性骨髓瘤（Multiple myeloma,MM）中分析BCMA的表达与不同临床特征之间的相关性及其预后价值。方法:收集2018年1月至2021年8月于武汉同济医院就诊的377例浆细胞疾病患者的病例资料,其中包括334例多发性骨髓瘤,21例系统性轻链淀粉样变性,14例意义未明的单克隆丙种球蛋白血症,5例POEMS综合征,3例具有肾脏意义的单克隆免疫球蛋白病。BCMA表达水平定义为骨髓流式细胞学检测的单克隆浆细胞膜BCMA表达率及平均荧光强度（Mean fluorescence intensity,MFI）。结果:MM患者BCMA表达率中位值为88.55%（范围,0.2%-99.9%）,BCMA MFI中位值为1281（范围,109-48586）,将其他浆细胞病列为一组,其BCMA表达率中位值55.8%（6.2%-98.9%）,BCMA MFI中位值553（182-5930）。在初诊MM中细胞遗传学高危组患者较低危组BCMA表达率更高（P=0.0002）,BCMA MFI更高（P=0.005）。BCMA表达率与β2-M呈显著正相关（r=0.1838,P=0.012）,BCMA MFI分别与年龄呈负相关（r=-0.1404,P=0.029）,与β2M呈正相关（r=0.158,P=0.032）,与乳酸脱氢酶（Lactic dehydrogenase,LDH）呈正相关（r=0.146,P=0.023）。在不同BCMA表达率以及MFI分组中,低于中位值组与高于中位值组在整体疗效上并无统计学差异。BCMA高表达与低表达组PFS差异无统计学意义。多因素COX回归分析中BCMA表达率及MFI均不能独立影响初诊患者的PFS。在复发进展MM中,细胞遗传学高危组较低危组BCMA表达率更高（P=0.046）,BCMA MFI也更高（P=0.021）;高BCMA MFI组较低组别患者中位PFS更短（2.95 vs 26.3月,P=0.022）。结论:BCMA不同程度地广泛表达于浆细胞疾病中。在初诊MM中细胞遗传学高危者以及高β2-M或高LDH者均表现出更高的膜BCMA表达。初诊时基线BCMA表达水平不影响患者可达到的最佳缓解深度,也不影响患者的无进展生存期。复发进展患者中细胞遗传学高危者较标危者BCMA表达更高,高BCMA MFI患者无进展生存期更短,但是否具有独立预后价值尚需进一步的研究。第二部分目的:探索多发性骨髓瘤中早老素增强子2（Presenilin enhancer-2,PEN-2）对B细胞成熟抗原表达的作用。方法:（1）收集并分析本中心一例接受BCMA CAR-T治疗后发生严重细胞因子释放综合征（Cytokine release syndrome,CRS）的患者临床资料。（2）为验证PSENEN基因功能,在两骨髓瘤细胞系RPMI-8226以及MM.1S中,利用CRISPR-Cas9技术构建PSENEN基因完全敲除（Knock out,KO）的细胞模型（PSENEN-/-）。一代测序筛选获得KO细胞系。在PSENEN基因完全敲除的细胞系RPMI-8226以及MM.1S中,利用慢病毒转染技术构建稳定表达野生型PEN2蛋白的细胞系（KO-PEN2）以及转入对照慢病毒的细胞系（KO-MOCK）。q RT-PCR及Western Blot验证PSENEN基因的表达。（3）CCK8法检测PEN2蛋白缺失的KO细胞系与野生型细胞系的增殖,流式细胞学检测KO细胞与野生型细胞对硼替佐米诱导的细胞凋亡差异。（4）流式细胞学检测野生型、KO细胞、KO-PEN2、KO-MOCK细胞膜BCMA（membrane BCMA,m BCMA）表达强度。酶联免疫吸附实验检测细胞培养上清可溶性BCMA（soluble BCMA,s BCMA）的水平。结果:本中心一例MM患者在接受BCMA CAR-T治疗后发生严重CRS反应,进一步分析其临床特征发现该患者m BCMA水平极高,s BCMA水平极低,二代测序提示其PSENEN基因发生错义突变合并单等位基因缺失。在进一步验证该基因功能的体外实验中发现,PEN2蛋白缺失的KO组骨髓瘤细胞增殖活性较野生组更高,而且KO组MM细胞对硼替佐米诱导的凋亡水平要低于野生组。在表达野生型PEN-2蛋白的KO-PEN2细胞中进行挽救实验发现,KO-PEN2细胞增殖能力变差,且对硼替佐米诱导的凋亡增加。KO组较野生组细胞m BCMA表达显著增加,且上清中检测到的s BCMA水平较野生组低。在挽救实验中,KO-PEN2细胞中m BCMA表达降低,同时s BCMA水平升高。随后用PSENEN基因表达质粒转染两KO细胞系。随着转染PSENEN质粒量的增加,细胞的m BCMA表达逐渐减少,而s BCMA水平也逐渐增加。结论:PEN2蛋白是调节多发性骨髓瘤细胞膜BCMA切割的重要因素,有可能成为调控膜BCMA表达的靶点。