灯盏细辛提取物对高压状态下视网膜保护作用的基因调控研究

来源 :成都中医药大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:getold
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目的:1.观察DSX对高压培养大鼠RGCs保护作用的基因调控。2.观察DSX对持续性高眼压大鼠视网膜保护作用的基因调控。3.探讨DSX的视网膜保护机制。方法:1.建立4小时80mmHg体外高压培养RGCs模型,利用基因芯片技术研究压力对大鼠RGCs基因表达的影响。2.在高压培养RGCs中加入DSX进行干预,利用基因芯片技术,观察DSX对RGCs基因表达的调控。3.采用Akira法,建立持续性高眼压大鼠模型,利用基因芯片技术研究持续性高眼压对大鼠视网膜基因表达的影响。4.用DSX灌胃持续性高眼压大鼠1月,利用基因芯片技术,观察DSX对高眼压大鼠视网膜基因表达的调控。结果:1.模型组和空白组RGCs有差异表达基因108条,其中凋亡基因NGFR、PAWR、S100B、ESTs和细胞骨架蛋白基因表达上调,表达下调的基因主要涉及神经系统发育、神经冲动传导、突触传递、离子通道性能、神经生理过程、细胞间信号转导、细胞黏附与细胞外基质等功能基因.2.RGCsDSX组和模型组差异表达基因51条,其中凋亡抑制基因Bcl2a1和Spp1上调,凋亡基因NGFR下调,4条外部生理刺激调控基因上调,3条ATPase活性基因上调;3.RGCs阳性对照组和模型组差异表达基因41条,其中凋亡基因S100B和NGFR表达下调,凋亡抑制基因Hmoxl上调;4.模型组和空白组差异表达基因22条,其中凋亡基因NGFR上调,CRYBB1下调;5.DSX组和模型组差异表达基因17条,其中凋亡基因NGFR表达下调,CRYBB3、CRYGD、CRYBB2表达上调。结论:1.高压导致谷氨酸代谢转运相关基因下调,谷氨酸代谢转运功能紊乱,造成细胞外Glu堆积,从而促进Ca2+内流,细胞内Ca2+超载,引发细胞信号转导系统的级联反应,上调凋亡基因的表达使RGCs凋亡。2.DSX可提高RGCs对外界刺激的反应,改善能量代谢,清除Glu,减轻Ca2+内流,避免细胞内Ca2+超载,阻断细胞内信号转导途径,使凋亡基因NGFR表达下调。3.DSX能上调凋亡抑制基因Bcl2a1和SPP1的表达,上调对RGCs有保护作用的晶体蛋白相关基因的表达从而保护视网膜。4.DSX对视网膜的保护作用靶点多、机制复杂,其保护作用可能是凋亡抑制基因与凋亡基因,在高眼压等病理状态下的拮抗与协同作用的结果。
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