糖尿病和糖尿病假丝酵母菌阴道炎大鼠模型阴道组织中TGF-β1的表达

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糖尿病是一组以慢性血葡萄糖水平增高为特征的代谢疾病群,是常见病,多发病。据WHO统计,20世纪70年代末80年代初,全球糖尿病患者达3000多万,到90年代中期,糖尿病患者已达到1.5亿,到2025年全球这个数字将会再增加一倍。我国关于糖尿病患者的调查显示:1979~1980年我国成人糖尿病患者患病率为1%,1994~1995年其患病率为2.5%。估计我国现有患者约3000万,居世界第2位。近年来,随着人民生活水平的提高,人口老龄化,生活方式的改变,糖尿病的发病率迅速增加。糖尿病假丝酵母菌阴道炎是糖尿病患者在几种常见的阴道炎中发病率最高的一种,即糖尿病妇女最易罹患假丝酵母菌阴道炎。而且糖尿病假丝酵母菌阴道炎具有难治愈,易复发的特点。因而,在糖尿病患病率逐年升高的背景下,探讨糖尿病假丝酵母菌阴道炎相关发病机制,寻找有效防治糖尿病假丝酵母菌阴道炎的方法,改善妇女生活质量具有重要意义。研究发现,雌激素诱导白假丝酵母菌阴道炎小鼠模型中,TGF-β1呈高水平表达,而TGF-β1是一种免疫调节因子,对细胞介导的免疫应答有抑制作用。同时有研究发现TGF-β1在糖尿病及其多种并发症的发生发展中起着重要的作用。由此我们推测:TGF-β1可能在糖尿病假丝酵母菌阴道炎的发病中起作用。因此,本次实验旨在研究TGF-β1是否在糖尿病假丝酵母菌阴道炎发生发展起作用,从而探索糖尿病假丝酵母菌阴道炎的可能发病机制。第一部分糖尿病和糖尿病假丝酵母菌阴道炎大鼠模型的构建目的:建立糖尿病大鼠模型及糖尿病假丝酵母菌阴道炎大鼠模型,为后续观察TGF-β1的表达情况做准备。方法:26只雌性SD大鼠(体重200g左右)禁食12h后,一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)65mg/kg。一周后成模的糖尿病大鼠随机选取10只建立糖尿病假丝酵母菌阴道炎模型。每只大鼠阴道接种白假丝酵母菌孢子5×10~8,接种后观察一周。以血糖水平判定糖尿病模型成模情况。以阴道灌洗液显微镜检和真菌培养判定假丝酵母菌感染模型成模情况。结果:一次性腹腔注射链脲佐菌素一周后,测大鼠血糖值均大于16.7mmol/L,并且出现多饮,多食,多尿等糖尿病临床症状。白假丝酵母菌接种一周后,大鼠阴道灌洗液中可见大量的孢子及中等量的假菌丝,真菌培养结果显示可见大量白色菌落生长。结论:本次实验成功建立糖尿病大鼠模型及糖尿病假丝酵母菌阴道炎大鼠模型。第二部分糖尿病和糖尿病假丝酵母菌阴道炎大鼠模型阴道组织中TGF-β1的表达目的:检测糖尿病和糖尿病假丝酵母菌阴道炎大鼠阴道组织中TGF-β1的表达水平,以探讨TGF-β1对糖尿病诱发假丝酵母菌阴道炎的可能机制。方法: 36只雌性SD大鼠(体重200g左右)随机分为糖尿病组(D组,n=26)和空白对照组(C组,n=10)。糖尿病组大鼠一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)65mg/kg。空白对照组一次性腹腔注射等量的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液。一周后,成模的糖尿病大鼠和空白对照组大鼠分别随机选取5只处死取阴道组织。剩余成模糖尿病大鼠随机分为糖尿病假丝酵母菌阴道炎组(DC组,n=10)和消炎痛治疗的糖尿病假丝酵母菌阴道炎组(DI组,n=10)。剩余空白对照组大鼠作为非糖尿病合并假丝酵母菌感染组(CC组,n=5)。三组均接种白假丝酵母菌孢子5×10~8。DI组于接种一天后阴道给予消炎痛治疗6天(2m M,100ul),其余两组给予等量无菌生理盐水。接种一周后,大鼠经阴道灌洗后处死,取阴道组织。灌洗液进行显微镜检和真菌培养。用ELISA方法检测大鼠阴道组织中TGF-β1的水平。结果: DC组可见大量孢子和中等量假菌丝;DI组可见少量孢子但未见假菌丝;CC组未见孢子。DC可见大量白假丝酵母菌菌落生长;DI组可见少量白假丝酵母菌菌落生长;CC组未见菌落生长。D组大鼠阴道组织中TGF-β1水平明显高于空白对照组,P<0.05,差异有统计学意义。DC组大鼠阴道组织中TGF-β1水平明显高于CC组,P<0.05,差异有统计学意义。DI组大鼠阴道组织中TGF-β1水平与DC组相比,P>0.05,差异没有统计学意义。结论:TGF-β1在糖尿病诱发假丝酵母菌阴道炎的发生发展中起着重要作用。
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