【摘 要】
：
研究目的:通过对前列腺穿刺患者尿液外泌体RNA测序分析筛选出具有显著差异表达的尿液外泌体mRNA,构建基于尿液外泌体mRNA的综合诊断模型,探讨其在前列腺癌（prostate cancer,PCa）早期诊断中的价值,减少不必要的前列腺穿刺,为开发相应的临床检测试剂盒提供依据。研究方法:使用超速离心法提取尿液样本中的外泌体,采用二代测序技术对尿液外泌体RNA进行测序分析,获得具有显著差异性表达的mR
论文部分内容阅读
研究目的:通过对前列腺穿刺患者尿液外泌体RNA测序分析筛选出具有显著差异表达的尿液外泌体mRNA,构建基于尿液外泌体mRNA的综合诊断模型,探讨其在前列腺癌（prostate cancer,PCa）早期诊断中的价值,减少不必要的前列腺穿刺,为开发相应的临床检测试剂盒提供依据。研究方法:使用超速离心法提取尿液样本中的外泌体,采用二代测序技术对尿液外泌体RNA进行测序分析,获得具有显著差异性表达的mRNA;根据表达量筛选出与前列腺癌相关差异最显著的前10个mRNA作为候选分子标志物,然后进一步探索这10个mRNA在尿液外泌体中的分布特点,针对靶基因的外显子设计探针和引物,通过RT-PCR产物表达量的比较,获得表达丰度高且条带单一的外泌体RNA片段;通过大量临床尿液外泌体样本（PCa 43例,前列腺增生92例）进一步验证,应用q RT-PCR技术检测候选mRNAs在两组独立研究人群中相对表达水平;运用单因素logistic回归分析预测PCa的独立危险因素;多因素logistic回归分析构建基于尿液外泌体mRNA的综合诊断模型;采用受试者工作特征曲线（ROC）评估相关指标及模型的诊断价值。研究结果:应用超速离心法成功分离出稳定的外泌体;我们探索了十个候选分子在外泌体RNA中的分布,通过对靶基因的片段分析,对每一个mRNA针对性的设计多个检测引物,应用RT-PCR找到了每一个靶基因中表达丰度最高且条带单一的PCR产物并针对性的设计检测探针,经过探针验证后最终获得8个外泌体基因,即WWP1、RBM10、ZFY、NRSN2、MARK2、PASK、HIST2H2BF、RAB5B;进一步扩大临床尿液样本对上述8个靶基因进行验证,q RT-PCR结果表明PCa组尿液外泌体中8个靶基因的相对表达量均高于前列腺增生组,差异具有显著统计学意义（均P<0.001）,单因素logistic回归分析结果提示这8个靶基因均是PCa的独立危险因素,ROC曲线显示它们对PCa具有良好的诊断价值,它们的AUC分别为WWP1（0.906）、RBM10（0.817）、ZFY（0.799）、NRSN2（0.856）、MARK2（0.801）、PASK（0.831）、HIST2H2BF（0.835）、RAB5B（0.880）;基于多因素logistic回归分析构建的尿液外泌体mRNA综合模型ROC结果显示,综合模型的AUC高达0.921,灵敏度为76.7%,特异度96.7%,阳性预测值和阴性预测值分别为91.4%和89%,尿液外泌体mRNA在PCa早期临床诊断方面具有极高的价值。研究结论:本研究基于尿液外泌体测序分析成功筛选出WWP1、RBM10、ZFY、NRSN2、MARK2、PASK、HIST2H2BF以及RAB5B八个显著上调PCa相关外泌体基因,进一步证实这8个靶基因是PCa的独立预测因子,可作为PCa早期诊断的潜在标志物,基于logistic回归构建的尿液外泌体mRNA综合诊断模型可提高PCa的早期诊断效能。
其他文献
背景与目的:自身免疫性肝炎（autoimmune hepatitis,AIH）是一种以高转氨酶和免疫球蛋白G（Ig G）的水平,自身抗体阳性为特征的,组织学上以界面性肝炎为特点的自身免疫性肝脏实质炎症。AIH合并干燥综合征（Primary Sj?gren’s syndrome,p SS）是一种临床上常见的疾病,但目前对此的病例报道较少,样本量均不多,因此目前尚不明确AIH合并SS是否具有特殊的临床
目的:对比分析阿帕替尼联合替吉奥节拍化疗（简称“AS方案”）、奥沙利铂联合替吉奥方案（简称“SOX方案”）、与索拉非尼单药（简称“SOR方案”）一线治疗不可切除或不宜行包括介入栓塞、射频消融、放疗等在内的局部治疗的晚期原发性肝癌的疗效及安全性。方法:回顾性收集2013年10月01日至2020年01月31日在广西医科大学附属肿瘤医院等医疗机构分别接受AS方案（阿帕替尼250mg bid,持续服药;替
目的:探讨非经典型急性早幼粒细胞白血病（APL）诊断及治疗。方法:报告3例非经典型急性早幼粒细胞白血病（APL）患者的临床特征、细胞形态学、免疫学、细胞遗传学及分子遗传学特点。同时,结合相关文献进行总结和分析。结果:病例A男性,35岁,白细胞计数6.16×10^9/L,骨髓早幼粒细胞占68%,染色体核型:46,XY,t（11;17）（q23;q21）,del（12）[8]/46,XY,[12]。P
目的观察肝癌高发家族中非肝癌成员血清白细胞介素-27（IL-27）表达水平变化,并探讨其临床意义。方法从肝癌高发家族的非肝癌人员中遴选81例纳入研究组,并以性别相同、年龄±5岁、相同的民族、相同的生活环境、相同HBs Ag表达作为配对条件,选取81例无癌家族的成员作为对照组,抽取两组成员空腹静脉血4 m L,用ELISA法检测两组成员血清IL-27的表达水平。采用通用的配对设计Wilcoxon秩和
背景和目的:随着我国国民经济的快速发展、人民物质生活水平的显著提高以及人口寿命的不断延长,心脑血管疾病死亡率所占的比重也越来越大。冠心病（CAD）和缺血性卒中（IS）已成为当今人类面临的一项巨大挑战。虽然CAD和IS分别隶属于两个不同的血管系统,但它们的危险因素、病理生理及防治方面存在交叉现象。已有多项研究显示某些基因的改变可影响血脂代谢,同时也影响到心脑血管疾病。有资料表明某些动力蛋白轴丝重链1
目的 探讨AChR抗体及Titin抗体双阳性重症肌无力患者的临床特点。方法 收集完善致病抗体检测的重症肌无力患者病历资料,按照致病抗体AChR抗体、Titin抗体等检测状况将患者分为ACh R抗体阳性组、ACh R抗体及Titin抗体双阳性组、抗体阴性组,对三组患者的性别、发病年龄、临床表现、起病分型、改良后Osserman分型、实验室检查、胸腺情况、电生理检查、是否诊断甲亢、OMG向GMG转化情
目的:系统评价甲状腺功能亢进性心脏病（甲亢心）发生的危险因素,为临床早期识别、预防、诊断、治疗该疾病提供参考依据。方法:计算机检索PubMed、Web of science、MEDLNE、Cochrane图书馆、Google学术、CBM、中国知网、VIP和万方数据库,搜集近10年有关甲亢性心脏病致病危险因素的病例对照研究。采用Note Express软件汇总及筛选文献。采用NOS量表对纳入文献进行
目的:分析长期低剂量吸入糖皮质激素（Inhaled Corticosteroids,ICS）对哮喘儿童身高的影响,为哮喘儿童临床用药的安全性进一步提供参考依据。方法:本研究为回顾性调查研究,共纳入2005年6月至2019年9月在广西医科大学第一附属医院儿科呼吸专科初次诊断为哮喘,长期（≥1年）规律接受低剂量ICS治疗,资料完整并定期随访,症状控制良好的133名哮喘儿童作为观察组,包括76名停药的哮
目的:探讨淋巴瘤相关噬血细胞综合征（lymphoma-associated hemophagocytic syndrome,LAHS）的临床特点及治疗和预后。方法:回顾性分析广西医科大学第一附属医院2012年01月01日至2018年12月31日期间住院诊治的LAHS患者的临床资料,分析LAHS的临床特点及治疗预后。结果:（1）收集到的LAHS共66例,占同期2233例淋巴瘤的2.96%。（2）66
目的:回顾性分析Ⅰ期卵巢颗粒细胞瘤的临床特征并讨论影响预后的因素。检索各大数据库中有关文献纳入meta分析,对术后化疗在Ⅰ期卵巢颗粒细胞瘤患者中的疗效进行评价。方法:收集2009年1月至2019年6月在广西医科大学第一附属医院收治的42例Ⅰ期卵巢颗粒细胞瘤患者的临床资料进行回顾性分析,利用SPSS26.0软件建立数据库行统计学分析。检索Pubmed、Cochrane library、Medline