谷氨酸对视网膜的损伤及银杏叶制剂对其保护作用的研究

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目的 探讨兔玻璃体注射不同浓度谷氨酸建立谷氨酸神经毒性模型和前房灌注生理盐水法制成急性高眼压模型后兔眼视网膜神经细胞的损害,NO、羟自由基水平的改变及银杏叶有效成分对其影响作用。方法 1、通过兔玻璃体内注入不同浓度的谷氨酸,建立视网膜神经毒性模型,观察其注射前后不同时间不同剂量ERG变化,眼球后注射不同剂量的EGB,采用分光光度法测定兔眼视网膜NO水平,琼脂糖凝胶电泳分析视网膜神经细胞DNA断裂情况。2、采用前房灌注生理盐水法制成兔急性高眼压模型后,治疗组静脉注射不同剂量的银杏叶黄酮,对照组静脉注射生理盐水,70h后所有组静脉注射水杨酸钠,以2.3-二羟安息香酸(2.3-DHBA)形式捕捉OH,用高效液相色谱仪结合电化学荧光仪检测2.3-DHBA的含量,用电化学荧光仪检测水杨酸盐的含量,来分析兔视网膜组织中的羟自由基的水平。结果 1、F-ERGb波、OPs波,在兔眼玻璃体内注入谷氨酸100μg/20μl时,波幅显著下降,随着时间的推移渐恢复,但注入300μg/20μl和600μg/20μl波幅显著下降,7天时仍未恢复。大剂量组与小剂量组相比ERG波波幅有显著差别;注入600μg/20μl谷氨酸同时注射40μg/20μl谷氨酸NMDA受体拮抗剂MK-801,ERG无显著变化。2、兔眼玻璃体内注入谷氨酸600 μg/20μl时,眼球后 第四军医大学99级硕士学位论文 注射不同剂量的EGB,实验组视网膜的NO的水平与空白对照组相 比显著增加bwto.001XEGB大剂量治疗组视网膜NO水比实验组显 著降低Ono.001卜EGB ,J’剂量治疗组视网膜的NO的水平与实验组 相比轻度降低但无统计学差别。EGB大剂量治疗组和空白对照组视 网膜细胞无DNA凋亡样断裂,而实验组和EGB小剂量治疗组视网 膜细胞 DNA凋亡样断裂。3,经过 sh的 50 mmHg高眼压然后恢复 到 15mmHg,72h后,模型组兔眼视网膜组织中的羟自由基的水平比 对照组显著增高O<0.ofX银杏叶黄酮治疗后大、中剂量治疗组兔 眼视网膜组织中的羟自由基的水平比模型组显著下降Ono刀1),与 对照组相比轻度增高但无明显差别。结论1,兔眼玻璃体注入的 谷氨酸大于或/和等于300 VS时对视网膜有严重的毒性作用,且具有 剂量依赖性。MK-801对其损伤具有重要的保护作用。二,银杏叶提 取物可能通过抑制谷氨酸诱导的兔眼视网膜NO自由基的产生而抑 制细胞凋亡,对谷氨酸诱导的兔眼视网膜损伤具有重要保护作用。 3,银杏叶黄酮具有清除高眼压状态下视网膜组织中产生的羟自由 基的损害,对高眼压状态下视网膜组织的损伤具有重要的保护作 用。
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