聚偏氟乙烯膜的制备及在免疫诊断中的应用

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本文以聚偏氟乙烯(PVDF)为膜材料,通过浸没沉淀相转化法制备出具有网络状对称结构的微孔膜。由于该PVDF膜独特的无皮层和网络状对称结构,因而具有极强的蛋白质吸附能力和良好的机械性能,可以作为胶体金免疫层析试剂和免疫斑点印迹的固相载体膜。在浸没沉淀相转化法制膜方面,首先研究了分步凝胶浴法制备PVDF膜;其次考察了醇系列添加剂对膜结构和性能的影响,获得了表面开放式、孔径分布均匀、截面对称的网络状孔结构的PVDF膜。该PVDF膜对蛋白的吸附量较高,分布于120-228μg/cm2之间。将醇为添加剂所制备的膜用不同缓冲溶液处理后用于胶体金免疫层析试剂(早孕类和毒品类产品)作固相载体膜,考察其跑板速度和显色效果。结果表明:以乙醇为添加剂的PVDF膜经1%STP(二甲氧基甲苯异丙胺)溶液浸泡后,将该膜用于早孕类和毒品类产品作固相载体膜,实验过程中分别用含绒毛膜促性腺激素(hCG)和吗啡(MOP)的尿液标本检测时发现标本在膜上的跑板效果好,C线(质控线)和T线(测试线)出现时间较快(T线在50秒内出现,C线在200秒内出现),显色状态较强(T线状态达G8,C线状态达G9)。因此,以乙醇为添加剂的PVDF膜应用于胶体金免疫层析试剂时跑板速度快,显色效果好,具有着良好的应用前景。将所制备的PVDF膜用甲醇处理后用于免疫斑点印迹实验中作固相载体膜,实验过程中在本实验制备的膜上分别点5μ1、10μ1、15μ1、20μ1四个阴性标本(100μg/ml小牛血清溶液)和四个阳性标本(干扰素样品),从实验结果可以看到有阳性标本时膜上会出现棕色的染色斑点,为阳性结果,而阴性标本位置均未出现紫色斑点,为阴性结果。实验结果表明制备的PVDF膜初步可以用作免疫斑点印迹的固相载体膜。
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