长链非编码RNA HOTAIR对胰腺癌细胞增殖及凋亡的影响作用

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目的研究HOTAIR基因对人体胰腺癌细胞生物学行为的影响,探讨HOTAIR对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响作用。方法将HOTAIR过表达质粒通过慢病毒携带,转染胰腺癌PANC-1细胞,在体外建立高表达HOTAIR基因的PANC-1细胞模型,借助荧光显微镜和实时荧光定量PCR(Real Time PCR)检测慢病毒转染效率。实验均分为对照组(不做任何处理的胰腺癌细胞)、空转组(转染空载体慢病毒的细胞)、Mimic组(转染过表达HOTAIR慢病毒的细胞)MTT方法检测各组胰腺癌PANC-1细胞的存活和增殖情况,TUNEL染色法检测各组PANC-1细胞的凋亡情况,Real Time PCR技术检测miR-214的表达量。结果感染带有过表达质粒的慢病毒后,胰腺癌PANC-1细胞HOTAIR的mRNA表达水平明显升高,结果表明成功在体外建立HOTAIR基因过表达的PANC-1细胞模型;MTT检测细胞增殖情况发现,在过表达HOTAIR后,Mimic组较对照组和空转组的PANC-1细胞的增殖能力明显增强;TUNEL染色实验显示:在过表达HOTAIR后,Mimic组较对照组和空转组PANC-1细胞的凋亡率明显下降;实时荧光定量PCR检测显示:在过表达HOTAIR后,Mimic组较对照组和空转组PANC-1细胞的miR-214表达量明显下降。结论胰腺癌PANC-1细胞中HOTAIR基因的表达上调可有效促进胰腺癌细胞的增殖,并且抑制胰腺癌细胞的凋亡,其机制可能与miR-214在胰腺癌细胞中的表达量有关。HOTAIR参与胰腺癌的发生发展过程,可能为胰腺癌基因治疗提供突破口。
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