论文部分内容阅读
目的:探讨磷脂酶C(PLC)抑制剂U73122对COPD大鼠CD8+T细胞肺内聚集及MMP-9,MMP-12表达的影响,揭示CD8+T细胞在COPD发病机制中的作用。方法:80只两月龄雄性Wistar大鼠(起始体重200±10g)随机分为对照组、COPD模型组和干预组。对照组(20只)于正常条件下饲养12周。模型组(20只)和干预组(40只)大鼠每6周通过气管内注射注入脂多糖200μg/只,并置于烟雾浓度为5%的密闭熏箱内(60 cm×40 cm×30 cm)每天30 min,共12周。干预组中20只大鼠每日通过尾静脉注入U73122(9mg/kg/只,Cayman Chemical,USA),其余20只通过尾静脉注入U73343(9mg/kg/只,Cayman Chemical,USA),持续12周。第1、4、8、12周各组随机处死5只大鼠,对肺泡灌洗液(BALF)中淋巴细胞,中性粒细胞,巨噬细胞进行计数,流式细胞术测定CD8+T细胞比例。ELISA法测定BALF及肺组织中IFN-γ表达水平,RT-PCR法检测肺组织内PLC, CXCL10, and CXCL11表达,western blot法检测肺组织内MMP-9,MMP-12的表达并观察肺组织平均肺泡数(MAN)及肺泡平均直径(LM)变化。结果:干预组和模型组大鼠PLC、CXCL-10、CXCL-11基因表达,MMP-9、MMP-12蛋白表达, IFN-γ水平及BALF中CD8+T细胞比例均高于对照组(P<0.05),干预组低于模型组(P<0.05),干预组MAN及LM较模型组改善(P<0.05)。结论:PLC抑制剂U73122不仅减少了CD8+T细胞的募集并且抑制了MMP9、MMP12的表达,磷脂酶C(PLC)信号途径可能在COPD大鼠CD8+T细胞肺内募集中起到重要作用。