目的：巨噬细胞是机体对病原体入侵做出防御的关键细胞，它参与炎症的发生和消除双重作用。当炎症发生时，巨噬细胞分泌促炎细胞因子及iNOS等生物活性物质介导炎症反应。研究发现，缺氧能够显著影响巨噬细胞的炎症应答和生物学功能，参与多种疾病如感染，慢性炎症和缺血的发生发展过程。通心络属中国传统中草药，在临床上广泛用于治疗各种心血管疾病，如动脉粥样硬化、心肌缺血、中风等，具有益气活血、通络止痛之功效，新近研究发现具有抑制炎症反应的作用。本实验通过体内、外实验观察通心络对缺氧诱导的巨噬细胞增殖的影响，发现缺氧可以显著诱导巨噬细胞缺氧诱导因子和炎症相关基因的表达，通心络可以通过下调上述基因的表达抑制巨噬细胞的增殖，减轻缺氧所致的炎症反应。方法：用氯化钴刺激RAW264.7细胞，建立化学诱导的巨噬细胞缺氧模型；用Real Time PCR和Western blot检测RAW264.7细胞HIF-1α、TLR-4、iNOS、NF-κB的mRNA和蛋白表达；MTS法检测巨噬细胞增殖情况；建立慢性和急性缺氧小鼠模型，免疫组织化学染色法检测肺组织中HIF-1α、TLR-4、iNOS、NF-κB表达情况，记录急性缺氧小鼠存活时间和呼吸频率。结果：1氯化钴促进RAW264.7细胞增殖为了研究缺氧对巨噬细胞生物学行为的影响，我们以RAW264.7细胞为研究对象，以氯化钴作为缺氧诱导因素，观察缺氧对巨噬细胞增殖的影响。MTS结果显示，缺氧可以诱导RAW264.7细胞增殖，浓度100μΜ时促增殖效果最明显。2氯化钴诱导HIF-1α、TLR-4、iNOS、NF-κB表达为了进一步研究缺氧促进巨噬细胞增殖的分子机制，我们进一步观察了缺氧诱导的HIF-1α和炎症相关基因的表达。Western blot和RT-PCR结果显示，与对照组相比，氯化钴可以显著诱导缺氧诱导因子HIF-1α和炎症相关基因TLR-4、iNOS、NF-κB的表达。3通心络抑制氯化钴诱导的RAW264.7细胞增殖为了研究通心络对氯化钴诱导的RAW264.7细胞增殖是否具有抑制作用，分别用不同浓度通心络预孵育RAW264.7细胞后加入氯化钴，MTS实验观察通心络对巨噬细胞增殖的影响。结果显示，通心络可以浓度依赖性的抑制氯化钴诱导的RAW264.7细胞增殖。4通心络抑制氯化钴诱导的HIF-1α、TLR-4、iNOS和NF-κB的表达为了进一步探讨通心络抑制缺氧诱导的巨噬细胞增殖的分子机制，我们分别采用RT-PCR和Western Blot检测缺氧诱导因子HIF-1α和炎症相关因子TLR-4、iNOS、NF-κB的表达，结果显示，缺氧显著诱导上述指标mRNA和蛋白的表达，通心络预孵育明显抑制缺氧诱导的上述基因表达。5通心络抑制慢性缺氧小鼠HIF-1α、TLR-4、iNOS和NF-κB的表达。为了进一步在整体动物水平上验证通心络通过抑制炎症信号通路逆转缺氧诱导的巨噬细胞增殖，我们构建了慢性缺氧和急性缺氧小鼠动物模型，收集各组肺组织样本。免疫组化结果显示，慢性缺氧组小鼠HIF-1α、TLR-4、iNOS、NF-κB蛋白表达明显增多；通心络抑制缺氧小鼠肺组织上述蛋白的表达。但是，通心络不改善急性缺氧老鼠的存活时间以及蛋白的表达。结论：1氯化钴促进RAW264.7细胞增殖2氯化钴诱导RAW264.7细胞炎性相关基因的表达3通心络抑制氯化钴诱导的RAW264.7细胞增殖4通心络抑制氯化钴诱导的RAW264.7细胞炎性相关基因的表达5通心络抑制慢性缺氧小鼠炎性反应，但不改善急性缺氧老鼠的存活时间以及炎性相关因子的表达。