目的:　　在前期关于人巨细胞病毒（HCMV）临床病毒株UL148基因结构功能系列研究的基础上，制备UL148抗体的间接酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒，明确该功能基因的优势抗原表位，建立检测HCMV UL148抗体的方法，优化检测体系，进行灵敏性与特异性的评价，观察不同临床表型与检测结果的相关性。探讨HCMV临床病毒株UL148抗体检测试剂盒的开发与应用的前景。　　方法：　　1.以课题组前期研究为基础，将应用生物信息学方法筛选的重复性好、抗原指数高的3条多肽（P1、P2、P3）作为HCMV UL148基因候选B细胞表位，本课题通过化学合成3条抗原多肽及免疫动物方法，获取免疫兔血清制备多克隆抗体，应用Western Blot鉴定HCMV UL148抗体，确定HCMV UL148 B细胞优势抗原表位。　　2.化学合成UL148 B细胞优势抗原表位作为包被抗原，通过方阵滴定法选择包被抗原和血清样本的最佳工作浓度，通过连续稀释法确定酶标二抗的最佳工作浓度，然后包被酶标板制作试剂盒，建立检测HCMV临床病毒株UL148抗体的方法。　　3.以经广东省妇幼保健院临床确诊为CMV性肺炎或CMV性肝炎及实验室检测HCMV阳性的血清标本作为实验组，以未感染HCMV的正常健康儿童作为阴性对照组，应用HCMV UL148抗体检测试剂盒分别对其进行检测；通过RT-PCR鉴定UL148基因的表达，研究HCMV UL148抗体检测试剂盒的灵敏性及特异性。　　4.将实验组分别按年龄、性别、病种、肝酶学指标、HCMV-IgM值分组，分析HCMV UL148抗体检测情况，应用统计学方法分析HCMV UL148表达在各组中的差异，观察不同临床表型与UL148抗体阳性的相关性，明确HCMV UL148的临床意义。　　结果：　　1. P1(HCMV UL148265-275)、P2（HCMV UL14818-25）、P3（HCMV UL148221-229）三条多肽均能免疫兔子产生抗体，且抗体效价随着免疫次数增加而升高。经Western Blot鉴定，证实仅P3段多肽免疫获得抗体能与临床病毒株HCMV UL148蛋白发生特异性结合，成为HCMV UL148 B细胞优势抗原表位。　　2.确定包被抗原P3（1mg/ml）最佳稀释度为1：160，血清样本最佳稀释度为1：100，酶标二抗的最佳稀释度为1：6000，优化了检测体系，建立了检测HCMV UL148抗体的方法。　　3.共收集标本67例，其中实验组52例，对照组15例，当临界值为0.246时，52例感染HCMV患儿血清用UL148抗体检测试剂盒检测出阳性例数为22例，阴性为30例；15例未感染HCMV的健康儿童血清中用UL148抗体检测试剂盒检测出阳性例数为0例，阴性例数为15例；HCMV-UL148抗体检测试剂盒的灵敏性为81.5％，特异性为100%。　　4.将实验组按年龄、性别、病种、肝酶学指标、HCMV-IgM值分组，分析使用HCMV UL148抗体检测试剂盒的结果，发现：≤3月龄组UL148抗体阳性检出数高于3-12月龄组，经卡方检验两组检查结果有统计学意义（P<0.05）；CMV性肝炎组UL148抗体阳性检出数高于CMV肺炎组，经卡方检验两组检查结果有统计学意义（P<0.05）；UL148抗体阳性组肝酶学AST、ALT、GGT三项指标均高于UL148抗体阴性组，两组相比有统计学意义（P<0.01）；按性别及IgM值等分组UL148抗体阳性检出率无明显差异。　　结论：　　1.经免疫动物及Western Blot鉴定，确定了P3为HCMV UL148 B细胞优势抗原表位，可作为UL148抗体检测试剂盒的包被抗原。　　2.本课题通过确定HCMV UL148B细胞优势抗原表位，建立了检测HCMV UL148抗体的方法，确立了优化检测体系，进行了灵敏性与特异性的评价，具有开发研制成人巨细胞病毒UL148抗体检测试剂盒的前景。　　3.(1) HCMV UL148基因的表达可能与年龄有关，3月龄内感染HCMV的患儿其UL148基因可能呈强表达；(2) HCMV UL148基因的表达可能与CMV性肝炎相关；(3) HCMV UL148基因的表达可能与肝酶异常相关；（4）HCMV UL148基因表达与性别、IgM浓度无相关性。