【摘 要】
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肿瘤细胞对抗癌药物产生抗药性是化疗失败的一个主要原因。多药耐药性(multidrug resistance MDR)是肿瘤细胞引起抗药性的最主要的原因,MDR基因编码的产物p-糖蛋白(permaeabi
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肿瘤细胞对抗癌药物产生抗药性是化疗失败的一个主要原因。多药耐药性(multidrug resistance MDR)是肿瘤细胞引起抗药性的最主要的原因,MDR基因编码的产物p-糖蛋白(permaeability-glycopritein,p-gp),是一类特殊的跨膜蛋白质,它可以将已进入细胞内的化疗药物泵出,使肿瘤细胞内药物浓度降低。传统的膜转运蛋白调节剂环胞霉素A、钙通道阻滞剂如异搏定等,由于严重的毒副反应而限制了其临床应用。探讨通过特异性封闭MDR-1基因,抑制MDR-1mRNA的表达,使p-gp合成减少,达到逆转MDR的目的,是MDR-1治疗研究的热点。目前MDR基因治疗的策略主要有:反义脱氧寡核苷酸(antisense ologodeoxyribonucleotides ASODN)、核酶技术、反义RNA技术。RNAi(RNA interference)技术诞生以来,作为基因沉默的一种新技术,不仅用于基因功能分析,而且作为基因治疗一种方法,RNAi技术在病毒学及肿瘤学研究领域均获得较大进展。 RNA干扰的基本原理是将与mRNA对应的正义RNA和反义RNA组成的双链RNA(dsRNA)导入细胞,可以使mRNA发生特异性的降解,导致其相应的基因沉默。这种转录后基因沉默机制(post-transcriptional gene silencing,PTGS)最终抑制蛋白表达。DsRNA在细胞内发挥作用的是21-23核苷酸长的小分子干扰RNA片段(small interfering RNAs,siRNAs)。 本研究目的:探讨RNAi技术逆转MDR的效果。分别利用化学合成的siRNA和通过构建siRNA表达质粒载体转入耐药细胞株,检测MDR基因的封闭效果,
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