第一部分P2X7R/NLRP3信号通路在慢性鼻窦炎伴鼻息肉中的作用机制目的:探讨嘌呤2X7受体（P2X7R）及其介导的Nod样受体家族包含pyrin结构域蛋白3（NLRP3）炎症小体信号通路在慢性鼻窦炎伴鼻息肉中的作用机制。方法:收集32例慢性鼻窦炎伴鼻息肉标本作为实验组,16例正常中鼻甲标本为对照组,通过蛋白质免疫印迹（WB）、免疫荧光（IF）和实时荧光定量PCR（RT-PCR）检测了P2X7R在鼻粘膜中的表达情况。7例慢性鼻窦炎伴鼻息肉标本用作原代人鼻上皮细胞培养,脂多糖（LPS）联合2’（3’）-O-（4-苯甲酰苯甲酰）ATP（Bz ATP）作用24小时,WB检测白细胞介素1b（IL-1b）的表达,确定LPS和Bz ATP对原代人鼻上皮细胞的联合刺激作用。使用选择性P2X7R拮抗剂A740003,拮抗LPS联合Bz ATP对原代人鼻上皮细胞的刺激,WB和RT-PCR检测A740003处理后P2X7R和NLRP3的表达,ELISA检测细胞培养上清中IL-1b的变化。结果:1.WB、IF和RT-PCR结果显示,P2X7R、NLRP3和IL-1b在慢性鼻窦炎伴鼻息肉中的表达高于对照组,特别是在嗜酸性慢性鼻窦炎伴鼻息肉中的表达较非嗜酸性慢性鼻窦炎伴鼻息肉的表达高;2.LPS联合Bz ATP对原代人鼻上皮细胞刺激作用较单用LPS强,IL-1b表达明显增加;3.LPS联合Bz ATP诱导的原代人鼻上皮细胞中P2X7R、NLRP3和IL-1b的表达升高,加入A740003后,P2X7R的表达没有显著变化,但NLRP3和IL-1b的表达被下调。结论:1.慢性鼻窦炎伴鼻息肉中P2X7R、NLRP3和IL-1b的表达高于对照组;2.LPS联合Bz ATP通过激活P2X7R/NLRP3信号通路上调鼻上皮细胞中IL-1b的表达,而A740003可抑制这一过程,推测P2X7R/NLRP3信号通路可能参与了慢性鼻窦炎伴鼻息肉的发生发展过程。第二部分P2X7R/NLRP3信号通路在小鼠急性鼻窦炎中的作用机制目的:建立稳定的小鼠急性鼻窦炎模型,探讨P2X7R及其介导的NLRP3炎症小体信号通路在小鼠急性鼻窦炎中的作用机制。方法:SPF级C57 BL/6小鼠60只,随机抽取12只为对照组,均不做任何处理。剩余48只作为实验组。实验组小鼠腹腔注射水合氯醛麻醉后,在显微镜下往小鼠右侧鼻腔塞入膨胀海绵,待小鼠清醒后,往右侧鼻腔滴入1mg/ml的LPS 20μl。7天后麻醉状态下处死小鼠,其中对照组4只+实验组12只小鼠用PBS-多聚甲醛全身灌流后制作冰冻切片;对照组4只+实验组12只小鼠用于提取右侧鼻腔粘膜蛋白;对照组4只+实验组12只用于提取右侧鼻腔粘膜m RNA;对照组4只+实验组12只小鼠右侧鼻腔灌洗后收集鼻腔灌洗液各1ml。用HE染色,观察小鼠鼻腔鼻窦炎症细胞浸润情况和鼻腔粘膜形态学改变,判断小鼠急性鼻窦炎模型是否成功;WB和IF检测P2X7R和NLRP3的表达;RT-PCR检测P2X7R和IL-1b的m RNA表达量;酶联免疫吸附试验（ELISA）检测鼻腔灌洗液IL-1b表达量。结果:1.HE结果显示实验组小鼠鼻腔鼻窦内可见大量中性粒细胞渗出,纤毛破坏严重,而对照组小鼠鼻腔鼻窦内无明显中性粒细胞渗出,纤毛无破坏;2.WB和IF结果显示P2X7R和NLRP3的表达量在实验组较对照组明显增多;3.RT-PCR结果显示P2X7R和IL-1b的m RNA表达量在实验组明显增多;4.ELISA结果显示实验组小鼠鼻腔灌洗液中IL-1b的表达量明显增多。结论:1.小鼠鼻腔内塞入膨胀海绵后滴加LPS能成功建立稳定的小鼠急性鼻窦炎模型;2.小鼠急性鼻窦炎鼻腔粘膜中P2X7R、NLRP3和IL-1b的表达上调,P2X7R/NLRP3信号通路可能参与了小鼠急性鼻窦炎的发生发展过程。