本文分为以下几个部分进行探讨：　　第一部分 通过调节NF-κB信号通路调节椎间盘退变性疾病的发生和发展　　目的:随着生活方式的改变，椎间盘退变性疾病(Intervertebral DegenerativeDisc Disease，IDDD)的发病率逐年增加，从而造成患者严重的经济负担。椎间盘退变性疾病的预后效果不佳，更重要的是椎间盘退变性疾病的发病机制尚不清楚。目前的观点认为，炎性因子是椎间盘退变性疾病发生的重要因素之一，并且，炎性因子能够降解椎间盘基质(Extracellular Matrix，ECM)。抑炎因子白介素-10（Interleukin-10，IL-10）作为一种免疫负调控机制的因子，IL-10在椎间盘退变性疾病发生中的功能尚不清楚。因此，本论文将探讨IL-10在椎间盘退变性疾病发生中的作用和可能的分子机制。方法:首先按照入选标准和排除标准，本研究以椎间盘退变性疾病患者和对照组为研究对象，从患者样本中收集和分离椎间盘髓核，对采集的椎间盘髓核进行体外培养。对椎间盘髓核细胞进行不同浓度(20mM，50mM，100mM)的IL-10处理，再采用MTT法检测各组处理后细胞增殖情况，使用caspase3活性试剂盒测定各组细胞的凋亡情况。通过实时PCR检测金属蛋白酶-4（A Disintegrin and Metalloproteinase with Thrombospondin Motifs-4，ADAMTS-4）基因的表达。实时荧光PCR和免疫印迹法检测核因子活化B细胞κ轻链增强子（Nuclear Factor Kappa-light-chain-enhancer of Activated B Cells，NF-κB）的表达。使用酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay，ELISA)法检测促炎因子IL-1和IL-6的水平。结果:IL-10有促进患者髓核细胞增殖的功能，并且抑制caspase3的活性，降低ADAMTS-4mRNA的表达，抑制炎症因子IL-1和IL-6的分泌(p＜0.05，与对照组相比)。IL-10的浓度越高，上述效应越明显（高剂量组与低剂量组比较，效果更明显，p＜0.05）。结论:IL-10抑制ADAMTS-4表达，并且，IL-10通过介导NF-κB信号通路而抑制炎症反应，从而参与细胞外基质代谢的调节，抑制髓核细胞的细胞凋亡，促进细胞增殖，从而减轻椎间盘退变性疾病的发病程度。　　第二章 老年椎间盘退行性疾病患者血清蛋白因子水平的表达和意义研究　　目的: IDDD严重威胁老年人的健康。根据本小组前期的实验结果的的基础上，本文将探讨中药膏药外敷经皮给药对老年患者IDDD血清嗜酸粒细胞阳离子蛋白（Eosinophil Cationic Protein，ECP）、细胞间黏附分子-1(Intercellular CellAdhesion Molecule-1，ICAM-1)、I型血管细胞黏附蛋白(Vascular Cell AdhesionMolecule-1，VCAM-1)及IL-2、IL-6、IL-8、IL-10水平的影响和其分子机理。　　方法:选取内蒙古科技大学包头医学院第一附属医院骨科采用核磁的Pfirrmann分级诊断为IDDD的老年患者90名，同时选取体检人群中的健康老年人90名，分别进行中药膏药外敷经皮给药组和对照组试验。采用(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay，ELISA)酶联免疫吸附试验检测各组血清ECP、ICAM-1、VCAM-l及IL-2、IL-6、IL-8、IL-10的水平。研究血清ECP、ICAM-1、VCAM-1及IL-2、IL-6、IL-8、IL-10水平与IDDD患者发生发展的相关性，是否可以作为IDDD患者发病的生物标记物，为临床相关疾病的诊断和治疗提供有价值的信息。阐明中药膏药外敷经皮给药通过调控嗜酸性细胞ECP的数目和功能以及血清中ECP、ICAM-1、VCAM-1及IL-2、IL-6、IL-8、IL-10的水平发挥治疗作用的可能的机制。结果:老年患者IDDD组血清ECP、ICAM-1、VCAM-1及IL-2、IL-6、IL-8、IL-10水平显著高于健康对照组中血清ECP、ICAM-1、VCAM-1及IL-2、IL-6、IL-8、IL-10水平，有统计学意义，p＜0.05。经中药膏药外敷经皮给药后，IDDD老年患者组血清ECP、ICAM-1、VCAM-1及IL-2、IL-6、IL-8、IL-10水平显著下降，与健康对照组无显著差异，p＞0.05。结论:血清中ECP、ICAM-1、VCAM-1及IL-2、IL-6、IL-8、IL-10可以作为IDDD患者发病的生物标记物，为临床相关疾病的诊断和治疗提供有价值的信息。　　第三部分 NF-κB信号通路在原发性髓核细胞自噬中分子机理的研究　　目的:椎间盘退变性疾病(Intervertebral Degenerative Disc Disease，IDDD)的发生机理尚不明确。细胞自噬异常与许多原发性髓核异常密切相关，尤其是IDDD。因此，本研究将探讨细胞自噬异常在IDDD发生的机理及其临床应用价值。方法:以原发性髓核细胞为细胞模型，使用紫外线照射细胞，使用免疫印迹(western blot)检测细胞原发性髓核细胞的自噬情况，自噬分子的表达水平和自噬信号通路NF-κB的活化情况。使用NF-κB信号通路的活化剂或抑制剂处理原发性髓核细胞的自噬，检测自噬分子的表达水平，自噬信号通路NF-κB的活化情况。使用相关性分析方法探讨NF-κB信号通路和细胞自噬与IDDD发生的相关性。结果:紫外线照射原发性髓核细胞引起细胞自噬，NF-κB信号通路活化。　　NF-κB信号通路的抑制剂抑制紫外线照射引起的原发性髓核细胞自噬的发生。而NF-κB信号通路的活化剂增强紫外线照射引起的原发性髓核细胞自噬的发生。不同发展程度IDDD组织中NF-κB信号通路活化情况，自噬水平与疾病严重程度呈密切正相关性。结论:紫外线通过NF-κB信号通路诱导IDDD细胞自噬，这可能是IDDD发生的分子机理之一。这提示了控制IDDD细胞自噬程度可能是治疗IDDD的可能的策略之一。