目的:研究成纤维生长因子-2(FGF-2)和Wnt/β-catenin通路对慢性血栓栓塞性肺动脉高压(CTEPH)肺动脉内皮间充质转化功能的影响。方法:人肺动脉内膜样本分别为正常对照组4份和CTEPH实验组4份,通过将TMT标记、高效液相色谱分级技术以及基于质谱的定量蛋白质组学技术等一系列前沿技术的有机结合,对样本进行定量蛋白组的研究。大鼠随机分为正常对照组和实验组,实验组又分为单纯血栓组、FGF-2激动剂处理组和FGF-2抑制剂处理组。实验组将大鼠自体血栓经左颈外静脉重复注入肺动脉以诱导CTEPH动物模型,正常对照组以等量生理盐水替代自体血凝块注入。每组根据不同时间分为2周、4周、8周三个亚组。FGF-2激动剂处理组用Oxotremorine-M以1mg/kg/d腹腔注射,持续2周,FGF-2抑制剂处理组用PD173074以2mg/kg/d腹腔注射,2周内给完,单纯血栓组以等量生理盐水腹腔注射。饲养2周、4周、8周后分别测定肺动脉压力。分离大鼠肺动脉,免疫组化法观察肺动脉内皮FGF-2、FGF-2RⅢc、Wnt、β-catenin、α-SMA和CD31抗原表达变化,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定肺动脉FGF-2、FGF-2RⅢc、Wnt、β-catenin、α-SMA和CD31 mRNA的含量,蛋白质印记(western blot)法测定肺动脉FGF-2、FGF-2RⅢc、Wnt、β-catenin、α-SMA和CD31蛋白表达,并进行比较和相关性分析。结果:人肺动脉内膜样本蛋白组学研究发现在CTEPH实验组中Wnt和β-catenin表达显著高于正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。CTEPH大鼠肺动脉发生了明显的间充质转化及重塑。激动剂组m PAP高于对应单纯血栓组,差异具有统计学意义(P<0.05),抑制剂组m PAP随着时间延长降低,但升高幅度下降,低于对应单纯血栓组但高于正常对照组。FGF-2、FGF-2RⅢc、Wnt、β-catenin、α-SMA、CD31 m RNA和蛋白表达在正常对照组表达无差异,FGF-2、FGF-2RⅢc、Wnt、β-catenin、α-SMA m RNA和蛋白在单纯血栓组和激动剂组表达随着时间延长表达上升,且都高于对应正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),CD31 mRNA和蛋白单纯血栓组和激动剂组表达随着时间延长表达降低,且都低于对应正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),抑制剂组FGF-2、FGF-2RⅢc、Wnt、β-catenin、α-SMA mRNA和蛋白表达随着时间延长降低,低于单纯血栓组但高于正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。FGF-2、FGF-2RⅢc、Wnt、β-catenin、α-SMA mRNA和蛋白呈栓塞时间依赖性表达增加,CD31 mRNA和蛋白呈栓塞时间依赖性表达降低。FGF-2RⅢc蛋白表达与mPAP、FGF-2蛋白、Wnt蛋白、β-catenin蛋白、α-SMA蛋白呈正相关、与CD31蛋白表达呈负相关。结论:CTEPH大鼠肺动脉内皮重塑明显,肺动脉内皮表型发生了明显改变,呈内皮间充质转化。FGF-2抑制剂PD173074可以减弱肺动脉内皮间充质转化,改善CTEPH大鼠肺动脉内皮重塑,降低CTEPH大鼠肺动脉压力。FGF-2激动剂Oxotremorine-M可以增强肺动脉内皮间充质转化,增强CTEPH大鼠肺动脉内皮重塑,升高CTEPH大鼠肺动脉压力。Wnt/β-catenin通路相关指标在肺动脉内皮间充质转化中显著增高,提示FGF-2可能通过Wnt/β-catenin通路参与CTEPH内皮重塑的过程,与CTEPH发生发展有关。