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西红花（Crocus satavus L．）系鸢尾科多年生草本植物，是一种珍贵的药材，用途广泛。其柱头不仅含昂贵的香料和色素，而且含有具有治疗作用的生物活性成分。西红花甙是其中最重要的药用成分。为了研究西红花药用成分西红花甙的资源，更好地利用西红花甙，本论文对西红花进行了分子生物学方面的研究：对西红花酸合成酶（7，8-二加氧酶）基因的克隆，并将其在大肠杆菌中表达，纯化诱导蛋白，制备相应的特异性抗体。西红花酸合成酶（7，8-二加氧酶）是西红花柱头中西红花甙生物合成途径中的关键酶。根据已发表西红花酸合成酶基因序列设计PCR特异性引物，从西红花柱头总RNA中扩增并克隆到一段长为1.2kb的片段。将该片段连接到pMD18-T载体上。挑选几个克隆测序，结果表明该片段含有两个序列。一个与已知西红花酸合成酶基因序列高度同源（同源性99％），命名为CsZCD。另一个的同源性为96％，命名为CsZCD-new。Southern杂交显示有两条杂交带。为了扩大西红花甙来源和寻找新的资源，本研究将克隆到的西红花酸合成酶基因CsZCD和CsZCD-new分别克隆到表达载体pQE31上，得到重组质粒pQE31-CsZCD和pQE31-CsZCD-new。重组质粒转化大肠杆菌E．coli M15，经IPTG诱导后，表达出了N端融合了6×His的融合蛋白，其表达量分别占菌体总蛋白的13.7％和14.4％。SDS-PAGE和Western blot分析表明，表达产物的分子量约为49kD和52kD。融合蛋白以包涵体的形式存在，将其变性后经HisTrapTMHP柱亲和纯化，得到纯化蛋白，用于制备抗体。用纯化蛋白免疫家兔，制得多克隆抗体。抗血清的效价均达1∶12800。Western blot分析表明，所制得的抗血清只能与CsZCD、CsZCD-new融合蛋白发生特异性的免疫反应。用制得的抗血清检测栀子未成熟果实的总蛋白，却发现里面并没有能与之相结合的条带。本实验的工作为进一步在蛋白质水平上研究CsZCD、CsZCD-new基因的表达调控，结构与功能的关系，CsZCD-new与CsZCD的差异，以及扩大西红花甙的来源打下了基础。