血凝素对大鼠补体(C3、C4)、细胞因子(IL-8、IL-18)水平的影响

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现如今,流感病毒感染每年都在全球蔓延,每当新型的流感病毒在人群中出现,极易导致严重的流感疾病爆发,引起疾病广泛传播和大量患者死亡,严重危害人类健康和社会经济发展。病毒血凝素(HA)是流感病毒的主要成分。HA是一种包膜糖蛋白,它与宿主细胞膜受体结合,并介导病毒和细胞膜的融合感染细胞。既往有研究表明,病毒血凝素可促发机体炎症反应,导致组织器官损伤。另外,HA作为包膜糖蛋白,进入机体后可激活免疫系统中的固有免疫,引起补体系统和细胞因子的异常,最终导致组织器官损伤。我们推测流感病毒血凝素可能在急性肺组织损伤中具有重要致病作用。目的:通过实验研究血凝素对大鼠补体(C3、C4)、细胞因子(IL-8、IL-18)水平的影响,进一步探究血凝素在急性肺组织损伤中致病作用。方法:健康清洁级的SD大鼠共42只,体重在170克到200克之间,雌雄大鼠均可,随机分为三组,每组含有6只大鼠,分别为空白对照组,PHA组(浓度为5mg/ml、10mg/ml、20mg/ml)及灭活PHA组(浓度分为5mg/ml、10mg/ml、20mg/ml)。然后由大鼠的尾静脉注射0.9%盐水、三种不同浓度的PHA及相应浓度的灭活PHA,给药剂量为每一百克体重注入1.5ml。12h后麻醉大鼠,下腔静脉取血,用ELISA法检测大鼠血浆中补体(C3、C4)、细胞因子(IL-8、IL-18)的含量。结果:1.大鼠血浆C4含量:5mg/ml、10mg/ml、20mg/ml PHA组大鼠血浆中的C4含量分别为(44057.71±1101.03)ng/ml、(48768.70±1940.07)ng/ml、(57534.03±4614.21)ng/ml,均显著高于空白对照组(39950.48±1724.38)ng/ml及对应的灭活PHA组(39581.77±1438.94、40252.82±1899.87、38810.98±1683.44)ng/ml,差异有统计学意义(P<0.05)。然而,相应浓度的灭活PHA组血浆C4的水平与空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.1)。2.大鼠血浆C3含量:5mg/ml、10mg/ml、20mg/ml PHA组大鼠血浆C3相应的含量为(2346.19±152.39、2582.73±245.89、3926.70±566.42)ug/ml,明显高于空白对照组(1498.05±122.72)ug/ml及对应浓度的灭活PHA组(1464.95±141.94、1453.25±90.65、1457.25±117.88)ug/ml,差异有统计学意义(P<0.05)。三种不同浓度的灭活PHA组大鼠血浆C3的水平与空白组比较,差异均无统计学意义(P>0.1)。3.大鼠血浆IL-8的含量:5mg/ml、10mg/ml、20mg/ml PHA组大鼠血浆中的IL-8相应的含量为(103.71±2.75)ng/L、(112.83±3.94)ng/L、(135.94±8.54)ng/L,均明显高于空白对照组(82.27±2.43)ng/L及相应浓度的灭活PHA组(86.81±7.08、95.37±3.97、116.00±3.40)ng/L,差异具有统计学意义(均P<0.05)。三种不同浓度的灭活PHA组大鼠血浆IL-8的水平与空白组比较,差异均无统计学意义(P>0.1)。4.大鼠血浆IL-18的含量:5mg/ml、10mg/ml、20mg/ml PHA组大鼠血浆中IL-18相应的含量为(0.15±0.01)ng/ml、(0.18±0.01)ng/ml、(0.56±0.12)ng/ml,显著高于空白组(0.06±0.02)ng/ml及相对应浓度的灭活PHA组(0.08±0.02、0.11±0.01、0.10±0.01)ng/ml,差异均具有统计学意义(P<0.01)。各浓度的灭活PHA组大鼠血浆IL-18水平与空白组比较,差异均无统计学意义(P>0.1)。结论:血凝素可以刺激机体激活补体(C3、C4)、引起炎症因子(IL-8、IL-18)升高,并且补体激活与炎症反应之间的相互作用又加剧了机体的组织病理损伤,最终加剧患者病情,出现重症肺炎、ARDS、MODS。我们推测在流感病毒造成的急性肺组织损伤中血凝素具有重要致病作用。
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