rhPTH(1-34)对兔下颌骨牵张成骨作用的实验研究

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目的:观察重组人甲状旁腺激素rh PTH(1-34)对兔单侧下颌骨牵张成骨的作用。为rh PTH(1-34)在牵张成骨领域的临床应用提供依据。材料及方法:选用40只SPF级日本大耳白兔(性别不限,体重2.0-2.5kg),随机分为对照组、rh PTH(1-34)12.5μg/kg剂量组、rh PTH(1-34)25μg/kg剂量组、rh PTH(1-34)50μg/kg剂量组,每组各10只,在实验动物右侧下颌体前磨牙前区、颏孔后区的下颌骨体部纵向断开并固定牵张成骨器,均建立右侧兔下颌骨牵张成骨模型。手术7天延迟期后,随即进入牵张期,速率为0.4mm/12h,连续牵张10天,延长下颌骨8.0mm。牵张期后进入固定期。各实验组自牵张期起根据给药剂量每天8点皮下注射相应剂量的rh PTH(1-34)溶解于2%热灭活标准兔血清1ml直至处死;对照组自牵张期期每天8点皮下注射0.9%生理盐水1ml。牵张手术结束后固定期的1周、3周分别处死实验组和对照组动物各5只,取出牵张侧下颌骨,通过牵张区局部标本进行大体观察、x线观察、HE染色及BMPs免疫组化分析,采用统计学软件spss17.0对所有的切片进行BMPs的光密度值统计分析,切取心肝肾等行常规病理检查。结果:1、实验动物全部耐受实验过程,未出现中途死亡。牵张器牢固稳定,兔右侧下颌骨成功延长8.0mm,右侧均出现偏颌及咬合紊乱。2、大体观察:固定期第1周,实验组较对照组骨断端界限稍模糊,更能促进新生骨骨痂形成。实验组高剂量组新骨形成的质量和密度明显好于低剂量组。固定期第3周新生骨已具有一定的硬度,给药组较对照组牵张区骨组织更加致密且光滑。实验组随着给药剂量增加成骨质量更佳。3、影像学观察:固定期第1周对照组骨断端中央可见明显透亮带、实验组随着剂量增加透亮带模糊。固定期第3周,对照组牵张间隙内可见逐渐致密组织,实验组随剂量增加骨小梁形成且数量逐渐增多,牵张区边缘逐渐与正常组织连续。X线表现可见实验组成骨质量较对照组高。实验组高剂量组成骨密度和骨边缘连续性强于低剂量组。4、组织学观察:组织切片显示随着时间的延长和rh PTH(1-34)剂量的增大,牵张间隙内新骨愈加活跃,新生骨逐渐成熟。实验组50μg/kg剂量组骨成骨效果最优。5、免疫组化观察:牵张区组织切片通过光密度分析仪分析后发现BMPs阳性染色区主要集中在成骨细胞、成纤维细胞及软骨细胞等处,牵张区两侧区域较中央区域深染色,对照组BMPs的阳性表达强于对照组。6、各组实验动物处死后切取的心、肝、肾样本进行病理学观察,均无明显异常。结论:间歇性应用重组人甲状旁腺激素(1-34)对兔下颌骨牵张成骨的新骨形成具有促进作用。
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