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目的:对全蝎镇痛、抗惊厥、抗凝药效活性进行评价,以药效活性追踪全蝎的有效成分,通过质量评价研究为全蝎的质量控制提供参考。 方法: (1)采用醋酸扭体法考察全蝎不同提取方法的镇痛药效,通过电惊厥模型研究全蝎不同提取方法的抗惊厥药效,运用血浆复钙时间、(牛)纤维蛋白原底物法与发色底物法探索全蝎不同提取方法的抗凝活性,并与活蝎蝎尾的抗凝活性进行了对比。 (2)采用超滤法初步判断全蝎提取液抗凝血活性物质分子量范围;运用多种色谱技术分离全蝎水煎煮提取液的醇沉上清部分和沉淀部分,并采用抗凝活性进行跟踪; (3)从显微鉴别、TLC鉴别、全蝎指纹图谱鉴别、PITC柱前衍生化法测氨基酸含量、原子吸收法测微量元素与重金属含量、基于抗凝血酶活性的效价研究等方面对全蝎质量评价进行研究。 结果: (1)通过对全蝎的镇痛、抗惊厥、抗凝等进行评价,以本课题创新的发色底物法测定抗凝血酶活性进行追踪,在全蝎抗凝血酶活性较强的截留分子量3KDa以下部位分离得到一个分子量为791的环七肽。 (2)建立的TLC鉴别方法具有一定的专属性,氨基酸含量测定中,16种氨基酸在线性范围内相关系数r均>0.9995,加样回收率在93.3%~104.6%之间;9种元素在线性范围内相关系数r均>0.9995,加样回收率在91.4%~114.0%之间;16批次全蝎药材与建立的共有模式HPLC指纹图谱比较,相关系数均大于0.9,建立了新的发色底物法测抗凝血酶活性,线性良好,回收率为97.9%,16批次全蝎抗凝血酶活性范围从5.1~37.2U/g,药材的平均抗凝血酶活性为18.6U/g。 结论:通过对全蝎药效活性研究,初步确定了中药全蝎镇痛、抗惊厥及抗凝活性较好的提取方法,初步阐明了全蝎的抗凝血酶活性部位,并对全蝎质量标准进行了系统研究,具有一定的参考意义。