当温度突然降低时,原核生物和真核生物都会表现出冷激反应,它们会通过合成冷激蛋白(coldshockproteins,Csps)来克服冷激的不利影响。CspA是大肠杆菌中一种主要的冷激蛋白,近来研究人员对其结构、功能和在转录、翻译水平的调控及mRNA稳定性等方面作了大量研究。但对于cspA上游调控元件存在的真实性、DB序列以及AT序列的作用机制仍然存在很大的争议。本文以pET-28a(+)为骨架构建以ZsGreen为报告基因,启动子分别为AT序列缺失、DB序列缺失及完整cspA启动子的表达载体,利用RT-PCR、SDS-PAGE及荧光分光光度计检测等方法对比分析三种载体的转录、翻译水平,初步探究CspA的表达与调控机制。实验结果显示:16℃条件下,大肠杆菌CspA启动子DB序列具有翻译增强作用;DB缺失能够提高cspA mRNA稳定性;16℃条件下,大肠杆菌CspA启动子AT序列对转录调控没有显著的作用;冷激2h后,CspA表达受到抑制,可能为转录后水平或翻译水平的调控;低温条件下表达重组蛋白的活性较高。