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目的:运用流式细胞术,检测新生儿脐带血中被FITC标记的阳性反应细胞,该阳性细胞为母源性Ig G致敏的胎儿红细胞,探讨此方法对新生儿ABO溶血病的临床诊断价值。方法:1.ABO血型及RH血型检测,利用血型正定型检定卡,对新生儿红细胞表面血型表型进行检测,筛选出与母亲存在ABO血型不合的新生儿。2.经皮胆红素测定,采用经皮测黄疸仪,每天动态监测新生儿经皮胆红素值(Transcutaneous bilirubin TCB),并记录生后3d内TCB值。3.FITC标记的阳性反应细胞检测,采集O型血母亲新生儿脐带血、拟诊断为新生儿溶血病患儿外周静脉血及本院因其他疾病入院患儿外周静脉血,各2ml置于K2-EDTA真空抗凝管中,混匀后,在4℃条件下保存。应用美国BD公司提供的BD FACSCalibur流式细胞仪、英国abcam公司提供的山羊F(ab’)2Anti-人类Ig G H&L(FITC),采用荧光标记、流式细胞术检测法检测血液中致敏红细胞百分率,操作严格按照说明进行。4.溶血系列,采集拟诊断为新生儿溶血病患儿外周静脉血2ml,送中心血站进行溶血三项检测。5.统计学的分析处理,本实验的研究数据运用SPSS22.0统计学软件进行统计分析,符合正态分布定量资料的统计描述,采用均数±标准差(x±s)表示,两组间比较采用t检验,检验水准α=0.05,定性资料组间比较采用2c检验,检验水准α=0.05。P<0.05为差异有统计学意义。结果:1.阴性阈值设定结果,对阴性阈值设定组检测结果进行统计学分析,阳性反应细胞的百分比均值为4.719%,标准差为1.641%,阴性阈值为6.630%。若阳性反应细胞的百分比大于6.630%,结果为流式细胞术检测阳性,考虑发生新生儿ABO溶血,反之为流式细胞术检测阴性。2.病例组脐带血与外周静脉血流式细胞术检测结果比较,两者阳性检出率一致,均为40个样本中检出阳性33个,阴性7个,两者阳性反应细胞百分比水平分别为29.25±15.43%、25.06±14.91%。两种血标本检测结果之间的差异无统计学意义(t=1.221,p=0.226)。3.病例组外周静脉血流式细胞术与溶血三项检测结果比较,40个样本中,流式细胞术检出阳性33个,阴性7个,溶血三项检测出阳性28个,阴性12个,两者阳性结果检出概率分别为82.5%、70.0%,两者间差异有统计学意义(2c=15.964,P<0.001)。4.病例组脐带血流式细胞术与外周静脉血溶血三项检测结果比较,40个样本中,流式细胞术检出阳性33个,阴性7个,溶血三项检测出阳性28个,阴性12个,两者阳性结果检出概率分别为82.5%、70.0%,两者间差异有统计学意义(2c=15.964,P<0.001)。结论:1.流式细胞术临床价值,与溶血三项检测试验相比,流式细胞术对新生儿ABO溶血病检测灵敏度高,可作为高度怀疑新生儿ABO溶血病、溶血三项检测阴性时的补充检测法;2.脐带血临床价值,脐带血与外周静脉血同时进行流式细胞术检测,检测结果一致,提示脐带血可能成为诊断新生儿溶血病的血液标本之一。