论文部分内容阅读
实验目的：探讨移植骨髓间充质干细胞对股骨骨折合并脑损伤大鼠免疫反应的影响(炎症介质、免疫状态)和对重要器官是否具有保护作用。实验方法Sprague-Dawley雄性大鼠55只,体重为250-300g,随机分为对照组,单纯损伤组和干细胞移植组。其中对照组5只,单纯损伤组35只,干细胞移植组35只。损伤组和干细胞移植组都造成右侧股骨干骨折合并中度闭合性脑损伤,干细胞移植组大鼠在造成复合伤5小时后,从尾静脉注射骨髓间充质干细胞4x106cell/只。在造模后1、2、3、5、7天分别从损伤组和干细胞移植组各5只大鼠腹主动脉采血,检测血浆IL6、IL-8、IL-10,检测循环血单核细胞表面MHCⅡ的表达、全血在脂多糖刺激后合成TNFα的能力,检测血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸肌酸激酶(CK)的含量,并检测每只大鼠肺湿干比重(W/D)。对照组不做任何处理,只做上述检测。取对照组5只大鼠、损伤组和干细胞移植组造模后1天各5只大鼠的肺、肝、心、肾做病理切片和HE染色。通过对比免疫指标的变化(炎症介质、单核细胞表面MHCⅡ的表达、全血在脂多糖刺激后合成TNFα的能力)和重要器官组织和功能(病理切片、生化指标、肺W/D)的改变,分析移植骨髓间充质干细胞对严重损伤大鼠免疫反应的调节作用和对重要器官的保护作用。实验结果：1.股骨骨折合并脑损伤大鼠在损伤后出现IL-6、IL-8明显上升,在损伤早期尤为明显,血浆IL-10早期是下降的,到后期有所回升。单核细胞表面MHCⅡ和全血体外TNFα合成能力在损伤早期即出现迅速下降,到观察期最后一天降至最低。AST、ALT、BUN、CK在创伤第1天组达到峰值,以后逐渐下降,Cr在创伤第1天开始升高,于第3天组达到峰值,以后逐渐下降,LDH在创伤后第3天达到峰值,以后逐渐下降。创伤组大鼠在致伤早期,肺湿干比(W/D)有所升高,在观察期后期,W/D稍有回落,但仍高于对照组。创伤后24小时肺、心、肝、肾病理切片可见,创伤早期重要器官出现急性损伤,对肺病理切片评分后发现,大鼠发生股骨骨折合并脑损伤后,大鼠肺损伤积分明显增加。2. BMSCs移植组大鼠在损伤后早期,血浆IL-6、IL-8有显著降低,而IL-10经历短暂下降后,出现明显的回升趋势,在观察期后期,血浆IL-10甚至高于对照组水平。BMSCs移植组大鼠,免疫功能指标(全血体外合成TNFα能力,单核细胞表面MHCⅡ)在损伤早期虽然出现迅速下调,但要高于同时间点创伤组大鼠。在观察中后期,可以观察到这两个指标上调的趋势。血清生化指标、肺W/D相对于同时间点创伤组大鼠有所降低,病理切片反应的组织损伤相对于创伤组亦有所减轻。结论：骨髓间充质干细胞能降低严重创伤的高炎性反应,并有效扭转创伤后的免疫抑制状态,从而保护重要器官。