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背景与目的:脑胶质瘤是一种严重危害人类健康的中枢神经系统恶性肿瘤,发病率呈现逐年上升的趋势,半数以上患者生存率不超过5年,且经过手术治疗后仍可再次复发。这几年对肿瘤干细胞的研究显示,在胶质瘤中存在胶质瘤干细胞(GSCs),此种细胞数量少、可自我更新、可多向分化以及具有体内致瘤能力。GSCs可促使胶质瘤复发以及降低放化疗的作用,在胶质瘤的发展中具有及其关键的作用。鉴于此,本研究以肿瘤干细胞理论为指导,对GSCs的放化疗抵抗性进行研究。方法:实验分两部分。第一部分:选取患者脑胶质瘤组织及恶性胶质瘤胶质瘤U251细胞,以CD133作为标志物进行免疫磁珠分选,根据CD133阳性细胞结果,进行单细胞克隆及裸鼠体内移植瘤试验等。第二部分:用X线高能直线加速器对分离出的胶质瘤干细胞进行X线辐射处理,在辐射后不同时间点用MTT法对细胞活性变化进行检测;于辐射处理72 h后,检测CD133和ABCG2表达,观察和研究小鼠的辐射结果与放射治疗结果。结果:第一部分:细胞球细胞中有明显的ABCG2与CD133阳性表达细胞;CD133和ABCG2的表达后,其在细胞球里呈现为悬浮生长,CD133+为3.16%,ABCG2为1.16%;经分选后,CD133+为88.1%、91.4%、87.3%;单细胞克隆形成试验,结果显示为CD133-细胞为1.4%~4.6%,CD133+细胞为78.4%~92.3%;CD133+裸鼠腹部接种后出现肿块,而CD133-无肿块。第二部分:U251肿瘤球细胞与U251细胞随辐射剂量增加和时间的延长,活性呈现显著下降(P<0.01);在相同辐射剂量照射不同时间,对细胞活性影响不同,但均表现为下降(P<0.01);经72 h辐射处理后,ABCG2与CD133表达均呈现上升;CD133经照射后,凋亡率在72 h呈现为不断增长;胶质瘤U251细胞球细胞和CD133细胞凋亡率有显著差异(P<0.01);CD133-与CD133+细胞进行替莫唑胺(TMZ)治疗,细胞死亡呈现显著增加。结论:经体外实验证实,胶质瘤U251中存在GSCs,表面标志物为ABCG2和CD133+。单独采用X线辐射或TMZ化疗,GSCs表现为显著抵抗性,但辐射和TMZ两者联合应用,能显著降低其抵抗性。