肝癌的发生发展一般会经历炎症、脂肪变性、肝硬化和肝细胞癌(HCC)等阶段,在此过程代谢发生了异常变化,特别是脂质代谢的紊乱。脂质作为细胞膜的重要组成成分,在肿瘤细胞血管的形成、细胞增殖、以及侵袭和转移中具有重要作用。研究正常和癌变肝脏的脂质含量变化,理解脂质代谢的调节和变化与肝癌的发生发展之间的关系,有望发现肝癌发生发展过程中的关键节点,对于肝癌疾诊断、控制和成功治疗具有重要意义。脂质组学分析为我们提供了一个新的途经去发现代谢异常与疾病的关系。在本研究中,我们使用二乙基亚硝胺(DEN)诱导C57BL/6小鼠建立肝癌模型,并用直接进样ESI-MS/MS方法检测肝癌不同发展阶段肝组织中的磷脂含量。之后我们利用多元数据分析方法来鉴定主要磷脂的变化,寻找调控磷脂变化的关键酶,并通过qRT-PCR和Western Blot验证了关键酶的表达水平。我们还通过在H22细胞中低表达或过表达相关关键酶基因,研究巨噬细胞对肿瘤细胞的免疫反应。研究结果表明,除磷脂酰丝氨酸(PS)外,大部分磷脂(PA、PC、PE、SM、LPA、LPC、LPE)在肝癌发展过程中均下调。qRT-PCR和Western Blot结果显示,PS脱羧酶(PISD)表达水平显着下降,而PS合成酶(PTDSS1,PTDSS2)在肝癌发展中的表达水平无明显变化。在临床患者的肿瘤和肿瘤邻近组织中也发现类似的结果。在siRNA抑制PISD后,H22中PS的水平增加,而在PISD的过表达时降低。随着H22细胞中转染的PISD siRNA的增加,共同孵育的巨噬细胞RAW264.7对H22的吞噬功能下降,而过表达PISD之后,RAW264.7的吞噬能力增强,这可能与PS诱导的免疫抑制有关。当过表达H22细胞的PISD时,共培养体系中的IL-1β显著上升。但是,在共培养体系中加入适量PS之后,IL-1β表达下降。因此,PS在肝癌发生发展中起着关键作用,其诱导免疫抑制微环境以防止巨噬细胞清除肿瘤细胞。