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探究了水蒸气蒸馏法和超临界CO2萃取法提取薄荷精油的工艺优化。正交试验中得出水蒸气蒸馏法提取薄荷精油的最优工艺为料液比为1.6,蒸馏时间为6h,浸泡时间为1h,薄荷精油得率可达到2.20%左右。其中提取时间对薄荷精油得率较显著。正交试验结果表明超临界CO2萃取法提取薄荷精油的最优工艺为提取压力为14MPa,提取温度为60℃,提取时间为15h时,薄荷精油得油率可达到293%左右。其中提取压力对薄荷精油得率较显著。 超临界CO2萃取法得出的薄荷精油中检测鉴定出了25种已知成分,水蒸气蒸馏法得出的薄荷精油中检测鉴定出了16种已知成分。在两种方法得出的薄荷精油中成分含量超过1%的组分有:1,8-桉叶素,柠檬烯,L-薄荷酮,薄荷呋喃,新薄荷醇,L-薄荷醇,香芹酮。 在从薄荷精油中分离L-薄荷醇的实验中,选择了硅胶柱色谱法作为分离方法,选择石油醚∶乙酸乙酯=80∶1的比例作为洗脱液,采用5%硫酸香草醛溶液作为硅胶柱色谱法的显色溶液。其中薄层色谱(TLC)鉴定中采用石油醚∶乙酸乙酯=8∶1的比例作为展开剂。薄层色谱鉴定结果显示L-薄荷醇组分被很好的分离开来,冷冻结晶实验和GC-MS结果表明,分离L-薄荷醇的纯度高达96.985%。 使用PLGA对L-薄荷醇分子进行包裹修饰,使其更好的发挥抑菌作用。扫描电镜表征表明,PLGA已经对L-薄荷醇分子进行了包裹修饰,赋予了L-薄荷醇纳米材料的优点。在L-薄荷醇PLGA对常见致病菌抑制实验中,筛选出其对耐药性大肠杆菌和金黄色葡萄球菌有较强的抑制作用。CFU实验结果表明,L-薄荷醇PLGA的抑菌活性要高于L-薄荷醇。MIC结果表明L-薄荷醇PLGA对大肠杆菌的MIC值为3.7±0.02μg/mL,对金黄色葡萄球菌的MIC值为5.2±0.04μg/mL。其中L-薄荷醇PLGA对大肠杆菌的抑制效果甚至要超过对照组的氨苄青霉素。LIVE/DEAD实验表明,L-薄荷醇PLGA对细菌细胞的致死率是相当高的,而且随着加药组浓度的提高,死细胞占总细胞的比例是越来越高的,也就是说,随着加药组浓度的提高,细菌细胞的存活率是越来越低的。根据扫描电镜实验结果,可以得出L-薄荷醇PLGA纳米粒子对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌有一定的破坏作用,会使其细胞膜发生褶皱,破裂,甚至伴随着内含物的流出。由此可知,L-薄荷醇PLGA纳米粒子的抑菌机制可能是破坏细菌细胞的细胞膜来达到抑菌效果。超薄切片实验表明L-薄荷醇PLGA纳米粒子可进入细菌细胞内部,破坏细菌细胞的细胞壁和细胞膜,从而达到杀死细菌的目的。β-半乳糖苷酶实验表明随着L-薄荷醇PLGA浓度的升高,对大肠杆菌膜结构的损伤越大。随着药物浓度的提高,大肠杆菌膜结构的破坏程度会越来越大;而且经过纳米化修饰之后的L-薄荷醇对大肠杆菌的膜结构破坏程度会有明显提高。