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背景与目的:帕金森病(Parkinson’s Disease,PD)作为神经系统的第二大退行性疾病,它除了存在运动功能方面的典型症状外,在睡眠、认知功能和情绪障碍等多个方面也严重影响着患者的生活质量。而在PD早期一些不健康的作息习惯例如晚睡晚起、熬夜对患者的认知功能以及情绪的影响目前尚不明确,因此,我们利用鱼藤酮(Rotenone)诱导的斑马鱼PD模型研究睡眠剥夺(Sleep Deprivation,SD)在PD学习记忆和情绪上的影响。材料与方法:对正常光照条件(昼夜比为14:10)下的四月龄雄性野生型斑马鱼给予Rotenone()处理四周,之后进行24小时的持续光照(24h)睡眠剥夺。采用自发活动、新物体识别以及黑白箱的行为学分别检测睡眠剥夺对正常斑马鱼和Rotenone处理的斑马鱼在运动、学习记忆和情绪上的影响。通过Western Blot方法验证Rotenone对斑马鱼脑部多巴胺(DA)能神经元的作用效果。通过高效液相观察睡眠剥夺对斑马鱼脑内DA含量及代谢的影响。使用实时荧光定量PCR技术检测睡眠剥夺后斑马鱼脑内多巴胺D1、D2和D3受体在m RNA水平上的变化情况。结果:自发活动的行为学结果显示鱼藤酮处理的斑马鱼在快速(>20mm/s)运动的时间和距离上均较对照组降低,而在慢速(>2mm/s和<20mm/s)和冻结(<2mm/s)运动的时间和距离上与对照组无差异,表明睡眠剥夺并不影响斑马鱼的总体运动能力。同时,Western Blot的结果表明鱼藤酮处理的斑马鱼脑部酪氨酸羟化酶(TH)的表达水平明显下降,而睡眠剥夺并不会加重TH蛋白的丢失。新物体识别行为学结果显示睡眠剥夺后鱼藤酮处理的斑马鱼较对照组记忆力的缺失更为严重,黑白箱行为学的结果也同样显示睡眠剥夺后鱼藤酮组更易焦虑抑郁。高效液相显示鱼藤酮处理后斑马鱼脑部DA和DOPAC的含量明显减少,而睡眠剥夺后DA的代谢比率增加。实时定量PCR结果表明鱼藤酮处理后斑马鱼脑内D2和D3受体在m RNA水平上表达上调,经过睡眠剥夺后则表现为下降,而D1受体在这一过程中变化并不明显。结论:以上研究结果表明,睡眠剥夺后鱼藤酮处理的斑马鱼在记忆和情绪上会有更为严重的损伤,并可能与脑内DA系统的改变有关。因此,当PD患者存在睡眠障碍时为了减轻在认知和情绪上的损伤,更应保持良好的作息。