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目的:细胞周期蛋白依赖的蛋白激酶3(CDK3)在肺癌侵袭转移的作用目前还不明确。我们实验室前期的研究发现CDK3能磷酸化转录因子krüppel-like factor 4(KLF4)的丝氨酸244(Ser244)位点。本课题的目的是研究CDK3/KLF4在肺癌侵袭转移的作用及机制。方法:(1)Western Blot检测CDK3和KLF4在肺癌细胞系的表达;(2)TCGA数据库、肺癌组织芯片、肺癌病人临床样本中CDK3和KLF4表达水平的检测以及分析;(3)构建CDK3过表达和敲低的肺癌细胞稳转株,Transwell migration assay和Transwell invasion assay实验研究其对肺癌细胞侵袭转移能力的影响;(4)构建KLF4以及其Ser244位点突变的质粒KLF4-S244A的过表达肺癌细胞稳转株,Transwell migration assay和Transwell invasion assay实验研究其对肺癌细胞侵袭转移能力的影响,探索CDK3磷酸化KLF4的Ser244位点对KLF4的功能产生的影响;(5)动物实验构建肺癌转移模型研究CDK3、KLF4、KLF4-S244A过表达对于肺癌细胞体内转移能力的影响;(6)CDK3/KLF4抑制肺癌细胞侵袭转移的信号通路研究;(7)qPCR实验研究KLF4可能对于CDK3存在调控作用。结果:(1)CDK3过表达抑制肺癌细胞的侵袭转移能力,敲低促进肺癌细胞的侵袭转移能力;(2)KLF4过表达抑制肺癌细胞的侵袭转移能力,KLF4-S244A过表达此作用削弱;(3)动物实验所得结果较少,从已有结果中可以看出,CDK3和KLF4过表达在体内实验中抑制了肺癌细胞A549的转移;(4)Western blot实验检测发现,KLF4过表达能抑制上皮间质转化(EMT),具体表现为EMT相关蛋白Snail、Slug、Vimentin、N-cadherin表达下降,KLF4-S244A是否削弱了KLF4对EMT的抑制作用目前还需进一步研究阐明;(5)qPCR检测到肺癌细胞中KLF4过表达导致CDK3表达增加。结论:(1)CDK3抑制肺癌细胞的侵袭转移;(2)KLF4抑制肺癌细胞的侵袭转移;(3)CDK3磷酸化KLF4的Ser244位点抑制肺癌细胞迁移和侵袭作用,该位点突变后KLF4抑制能力削弱;(4)在肺癌细胞中KLF4抑制EMT过程,KLF4的Ser244位点突变对其作用影响目前还需进一步研究阐明;(5)KLF4过表达的肺癌细胞中CDK3表达量也上升,提示KLF4可能对CDK3也存在调控作用。