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本研究以‘二细一粗’银条(Stachys floridana Schuttl.ex enth)茎尖、‘郑抗四号’无籽西瓜(Zhengkang No.4Citrullus lanatus)愈伤组织和软籽石榴(punica granatum)带芽茎段为试验材料，对其预培养条件、装载液筛选、脱水处理、液氮保存、化冻温度、洗涤方式以及冻存后植株再生条件进行了研究，采用氯化三苯基四氮唑(TTC)还原法和再培养两种方法对冻存后材料进行了检测。主要研究结果如下：
1.建立了适于银条茎尖保存的玻璃化法超低温保存技术体系：选择继代4次的无菌壮苗，5℃低温驯化2周后，剥取5mm的茎尖在含有0.5 mol·L-1蔗糖的MS(无Ca2+)液体培养基上预培养1d；25℃条件下经2PVS2装载20 min；然后用PVS2溶液于-20℃、95％乙醇浴中脱水处理4h；更换新鲜的PVS3迅速投入液氮，保存24 h，取出冷冻管后在40℃水浴中迅速化冻1min用含有1.2 mol·L-1蔗糖的改良MS(无Ca2+)溶液洗涤2次，每次10 min；用TTC法测得的茎尖相对成活率达70％以上。将洗涤后的茎尖转入MS+6-BA 4.5mg·L-1+GA3 1.0 mg·L-1蔗糖30 mg·L-1的固体培养基上，暗培养20 d后转入正常光照条件下培养，得到正常分化和生长的再生植株，生根后可移栽成活。
2.西瓜愈伤组织适宜的超低温保存程序为：未继代的西瓜愈伤组织在含有80 g·L-1蔗糖的液体培养基中预培养10d后；在25℃条件下用2PVS2溶液装载20 min，PVS2脱水处理4h；换新鲜的PVS3迅速投入液氮，保存24 h，取出冷冻管后在40℃水浴中迅速化冻1 min：用含有1.2 mol·L-1蔗糖的改良MS(无Ca2+)溶液洗涤2次，每次10 min。TTC法测得的西瓜愈伤组织相对成活率达76.24％。将洗涤后的愈伤组织接种在MS+6-BA3.0 mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1培养基上，暗培养2周后，转入光周期为16/8 h·d-1(光/暗)条件下再培养，6周后愈伤组织再生率达38.13％，并且冻存后成活的愈伤组织可形成丛生芽。
3.石榴带芽茎段组织快繁的主要研究结果：石榴茎段芽诱导培养基为MS+6-BA1.2mg·L-1+IBA 0.1 mg·L-1+椰汁200 m1·L-1，30 d后统计结果表明平均每芽有4.3个分枝、芽长均大于1.5 cm。石榴无菌壮苗诱导生根相对容易，接种在l/2 MS+NAA 1.2 mg·L-1上，生根率达到73％，根多且生长健壮。
4.石榴带芽茎段包埋玻璃化法超低温保存步骤：以株龄为30 d的无菌壮苗为试材，置于5℃低温条件下驯化15d后，切取长约5mm左右的带芽茎段，形成直径约5mm的包埋丸，在分别含有0 mol·L-1、0.3 mol·L-1、0.5mol·L-1、0.7 mol·L-11、1.0 mol·L-1蔗糖+改良MS液体培养基(5种处理)上预培养包埋丸1d，在25℃条件下2PVS2装载20 min，PVS2溶液)水处理0 h、2 h、4 h，将包埋丸转入1.8 ml冻存管中，加入新鲜的PVS2快速投进液氮(LN)，保存24 h，取出冻存管后在40℃水浴中迅速化冻，用含有1.2 mol·L-1蔗糖的改良MS(无Ca2+)溶液洗涤2次，每次10 min，接种在芽增殖培养基MS+6-BA 1.0 mg·L-1+IBA 0.1mg·L-1+椰汁200 ml·L-1上，20 d暗培养后转入光下培养，35 d后未见完整的再生植株。