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目的:(1)通过对大鼠心脏冠状动脉左前降支进行结扎,诱导大鼠出现急性心肌梗死模型,并对模型有效性进行评估。(2)通过制备心肌梗死模型,探索A型激酶锚定蛋白5(AKAP5)介导β-肾上腺素能受体(β-ARs)对心肌梗死后大鼠心功能的影响及其可能的机制。(3)通过制备心肌梗死模型,探索A型激酶锚定蛋白5(AKAP5)介导β-肾上腺素能受体(β-ARs)对心肌梗死后大鼠心肌肥大的影响及其可能的机制。方法:(1)选择健康的成年SD大鼠,用10%的水合氯醛麻醉,在通过常规插管后将其连接至呼吸机并进行参数调节。打开胸腔以暴露心脏,切开心脏包裹物以找到冠状动脉,并结扎左前降支。通过多导生理仪记录手术前后心电图变化。(2)将体重相近的成年大鼠进行随机分组:假手术对照组(sham组)、心肌梗死模型组(model组)、美托洛尔组(Metoprolol组)。模型组和美托洛尔组常规心肌梗死造模,对照组只打开胸腔和心包而不结扎冠状动脉。术后正常喂养4周,进行药物干预8周。通过M型超声心动图对各组大鼠心脏功能进行评估,同时应用Western Blot法检测AKAP5、PLN、p-PLN的表达水平的变化,应用免疫共沉淀法检测AKAP5、PKA、PLN间的相互作用。(3)通过心脏与体重比值评估各组大鼠心肌肥大情况,同时应用Western Blot法检测COL1、COL3、NFATc3/p-NFATc3、GATA-4的表达水平的变化,应用免疫共沉淀法检测AKAP5与PP2B间的相互作用。结果:(1)冠脉前降支结扎后,可见左心室前壁及心尖处缺血变白;同时在心电图上可见结扎后Ⅱ导联ST-T段明显抬高。(2)超声心动图示:与对照组相比模型组和美托洛尔组大鼠心脏射血分数(EF值)均明显下降(P<0.05);对比美托洛尔干预组,心脏射血分数较模型组显著上升(P<0.05)。心肌梗死后心功能减退时,AKAP5含量以及p-PLN/PLN相对表达量较对照组降低(P<0.05)。而美托洛尔干预后,AKAP5含量与p-PLN/PLN相对表达量比模型组升高(P<0.05)。以AKAP5为目的蛋白的免疫共沉淀体系中,检测到PKA、PLN蛋白的表达。(3)心肌梗死后发生心肌肥大时,心脏与体重比值以及COL1、COL3的表达量均较对照组增加(P<0.05);而美托洛尔干预后,心脏/体重比值和COL1、COL3的表达量较模型组减少(P<0.05)。模型组和美托洛尔组NFATc3/p-NFATc3、GATA-4的表达量与对照组相比明显增加(P<0.05),而与模型组相比美托洛尔组NFATc3/p-NFATc3、GATA-4的表达量降低(P<0.05)。以AKAP5为目的蛋白的免疫共沉淀体系中,检测到PP2B蛋白的表达。结论:(1)采用心脏冠状动脉左前降支结扎法可以有效制备大鼠急性心肌梗死模型。(2)AKAP5可能介导β-ARs调控大鼠心肌梗死后心脏功能。(3)AKAP5可能介导β-ARs调控大鼠心肌梗死后心肌肥大。