家蚕微孢子虫（Nosema bombycis）是导致家蚕微粒子病的病原,寄生在活的宿主细胞内,具有真核生物的特征,是蚕种生产和贸易上的检疫对象。随着对家蚕微孢子虫分子生物学研究的逐渐深入,对微孢子虫生活周期的了解更加明朗,深入研究家蚕微孢子虫侵染和复制增殖的分子机制,将为家蚕微粒子病的预知检查和综合防控提供理论依据。解旋酶DNA2具有解旋酶和核酸酶的作用,其参与DNA复制过程中冈崎片段的加工和成熟,并对DNA修复和端粒保护以及维持基因组完整性有重要作用。本论文在课题组建立的家蚕微孢子虫（广东株）转录组数据库中,发现了家蚕微孢子虫（Nosema bombycis）的解旋酶DNA2基因。通过PCR扩增和测定鉴定对家蚕微孢子虫基因组中DNA2基因的存在进行验证后,根据家蚕微孢子虫DNA2基因ORF序列设计并筛选了特异性鉴定和检测家蚕微孢子虫的引物。对感病家蚕中肠组织和蚕卵中的家蚕微孢子虫DNA2基因的转录表达进行了分析测定,克隆表达家蚕微孢子虫DNA2后,纯化蛋白并对重组蛋白的ATP水解活性和解旋酶活性进行了测定。主要获得以下结果:（1）根据家蚕微孢子虫转录组数据库中的DNA2基因信息,设计了7对引物,经过PCR扩增和测序,验证了家蚕微孢子虫DNA2基因的存在。（2）根据家蚕微孢子虫DNA2基因的ORF序列,设计并筛选出能特异性鉴定和检测家蚕微孢子虫的DNA2基因引物。（3）对家蚕微孢子虫DNA2的生物信息学分析结果表明,家蚕微孢子虫DNA2解旋酶具有核酸酶结构域和解旋酶结构域,推测其同时具有解旋酶和核酸酶功能。（4）在感病家蚕的中肠和蚕卵中,家蚕微孢子虫DNA2基因的表达开始是随着感染时间的延长而上升,之后逐渐降低,最后趋于正常水平。（5）克隆家蚕微孢子虫DNA2基因ORF全长序列,构建了pET-28a-DNA2重组质粒,并进行了原核表达,纯化获得了重组蛋白。（6）家蚕微孢子虫DNA2重组蛋白具有ATP水解活性和解旋酶活性,两种活性均需要Mg²⁺,Mn²⁺,Ca²⁺这三种二价金属离子的参与。全文创新之处:验证并鉴定了家蚕微孢子虫的DNA2基因,通过PCR扩增、测序,生物信息学分析、表达分析和重组蛋白的功能测定等,验证了其在家蚕微孢子虫的存在。并基于DNA2基因设计和筛选了特异引物,可用于家蚕微粒子病的检测和研究,申请了一项专利（专利申请号:201710301862.1）。本研究为深入探讨解旋酶DNA2在家蚕微孢子虫侵染宿主后的复制增殖中的作用以及家蚕微孢子虫在宿主体内复制增殖的分子机制提供了基础和依据,为微粒子病的分子诊断和治疗提供了新的思路。