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目的：研制玉米赤霉烯酮（zearalenone，ZEN）毒素抗独特型单克隆抗体，以替代毒素标准品用于免疫学检测，从而建立玉米赤霉烯酮无毒ELISA检测技术。方法：1.ZEN与O-（羧甲基）羟胺（CMO）反应，衍生成半抗原ZEN-CMO，高效液相色谱串联质谱法（LC-MS）鉴定半抗原，然后采用活泼酯法将ZEN-CMO分别与载体蛋白牛血清白蛋白（BSA）、卵清蛋白（OVA）偶联制备人工抗原，紫外吸收光谱分析法、SDS-PAGE法鉴定人工抗原偶联效果。通过动物免疫及杂交瘤制备等技术制备ZEN单克隆抗体（Ab1），并对其效价、亚类、特异性等方面特性进行鉴定；2.在研制了ZEN单抗的基础上，将ZEN单抗（Ab1）与载体蛋白KLH偶联作为免疫原，Ab1经固定化胃蛋白酶酶切，获得ZEN单抗片段Fab，作为包被原，通过动物免疫及杂交瘤制备等技术制备ZEN抗独特型单克隆抗体（Ab2），并对其效价、特异性，类型等方面特性进行鉴定；3.研究ZEN抗独特型抗体与ZEN毒素之间的相关性，并基于独特型-抗独特型反应初步建立检测玉米样品中ZEN无毒ELISA检测技术。结果：1.制备了ZEN的人工抗原ZEN-BSA和ZEN-OVA，经紫外吸收光谱分析法和SDS-PAGE法鉴定，人工抗原偶联成功且偶联比分别为3.1:1、16.9:1；2.成功获得1株稳定分泌抗ZEN单抗的杂交瘤细胞株,命名为1G4，其细胞培养上清效价为1：6.4×103，腹水效价为1：1.6×105，抗体亚类为Ig G2b，对ZEN的IC50为10.2ng/ml，检测限为0.58ng/ml；3.成功制备出ZEN单抗的Fab片段, Western blot结果表明Fab分子量为50kD，间接ELISA结果表明Fab保持较高生物学活性；4.成功获得6株稳定分泌ZEN抗独特型抗体（Ab2）的杂交瘤细胞株,分别命名为1D5、2D9、3F8、3H8、6D8、2B7，细胞培养上清效价均达到1:120以上，腹水效价为1:1.2×105～1:2.0×105，间接竞争ELISA结果表明这6株单抗（Ab2）与ZEN竞争结合ZEN单抗1G4（Ab1），均为β型抗独特型抗体（Ab2β），这6株抗体对ZEN的IC50值在10.09～54.48ng/mL之间；5.利用ZEN单抗（Ab1）及ZEN抗独特型抗体（Ab2β）建立了检测ZEN无毒ELISA定量检测技术，ZEN抗独特型抗体与ZEN毒素之间的替代标准曲线方程为：y=57.21x-7.711，R2=0.990（y为ZEN毒素浓度ng/mL；x为抗独特型抗体浓度μg/mL），检测限为2.63ng/mL，线性范围为2.63～100.64ng/mL，实际玉米样品的加标回收率为82.13%～88.41%。批内变异系数在8.25%～9.35%之间，批间变异系数在6.54%～9.41%之间。结论：1.成功获得了高效价，高特异性的ZEN单抗（Ab1）；2.成功制备了ZEN抗独特型单克隆抗体（Ab2），经鉴定为β型抗独特型抗体（Ab2β）；3.ZEN抗独特型单克隆抗体作为毒素的替代物与ZEN毒素标准品之间有较高的相关性，可以替代ZEN标准品用于免疫学检测；4.利用ZEN单抗及抗独特型抗体初步建立了能用于检测玉米样品中ZEN无毒ELISA定量检测技术。