论文部分内容阅读
目的:采用RT-PCR、Western blot、免疫组化法分别检测甲状腺乳头状癌组织与癌旁正常甲状腺组织标本中DcR3 mRNA及蛋白的表达情况,探讨DcR3在甲状腺乳头状癌组织中的表达及临床意义,揭示DcR3与甲状腺乳头状癌发生发展的关系。 材料与方法: 1.材料:收集台州学院附属市立医院肿瘤外科2012年2月至2013年1月间手术切除的甲状腺乳头状癌组织及癌旁正常甲状腺组织标本各50例,其中,甲状腺乳头状癌组男性12例,女性38例,年龄25~60岁,中位年龄41.5岁;癌旁正常甲状腺组男性19例,女性31例,年龄28~61岁,中位年龄43岁。组织标本大小为0.5cm-1.0cm不等,一半于30 min内置于80℃冰箱保存,一半浸泡于10%的福尔马林溶液中。所有组织标本均经医院病理证实,患者术前均未行放化疗。 2.方法: 2.1甲状腺乳头状癌中DcR3 mRNA的检测:QRT-PCR(Quantitative realtime polymerase chain reaction,QRT-PCR)法对比分析DcR3的mRNA在甲状腺乳头状癌组织、甲状腺乳头状癌旁正常甲状腺组织中的表达情况,表达的差异采用独立样本t检验分析,P<0.05有统计学意义。 2.2甲状腺乳头状癌中DcR3蛋白的检测: 2.2.1免疫组织化学法(IHC)检测甲状腺乳头状癌组织、甲状腺乳头状癌旁正常甲状腺组织中的DcR3蛋白表达情况,表达的差异采用独立样本t检验,P<0.05有统计学意义。 2.2.2 Western blot法检测甲状腺乳头状癌组织、癌旁正常甲状腺组织蛋白表达高低情况,数据比较采用独立样本t检验,P<0.05有统计学意义。 结果:1.RT-PCR法检测DcR3在甲状腺乳头状癌组织中的mRNA表达量为2.0583±0.1215,与甲状腺乳头状癌旁正常甲状腺组相比,其在甲状腺乳头状癌组织中的表达明显增高,经独立样本t检验分析,P<0.05,有统计学差异。2.免疫组织化学法检测示DcR3蛋白在甲状腺乳头状癌组织中阳性率为48%,甲状腺乳头状癌旁正常甲状腺组织阳性率为22%,甲状腺乳头状癌组织中DcR3蛋白表达的阳性率高于癌旁正常甲状腺组织,经x2检验分析,P<0.05,有统计学意义,但DcR3蛋白的表达水平与患者性别、年龄、肿瘤大小、有无淋巴结转移及病理分期均无相关性,差异无统计学意义(P>0.05)。3.Western blot法检测DcR3蛋白在甲状腺乳头状癌中蛋白质表达水平为1.5527±0.2102,其在癌旁正常甲状腺组织中的蛋白质水平的表达为0.5431±0.1074,甲状腺乳头状癌组织中DcR3的表达量明显高于癌旁正常甲状腺组织,经统计学分析, P<0.05,有统计学意义。 结论: DcR3在甲状腺乳头状癌及癌旁正常甲状腺组织中均有表达,与癌旁正常甲状腺组织相比,甲状腺乳头状癌组织标本中DcR3在基因转录和蛋白质表达水平上均表现为明显增高,提示DcR3高表达可能是甲状腺乳头状癌发生发展过程中一分子事件,可能起了促进甲状腺乳头状癌的发生发展的作用。